隱丹參酮對人非小細胞肺癌抑制作用的研究.pdf

1、目的:研究隱丹參酮對體外人非小細胞肺癌A549細胞模型和體內人非小細胞肺癌荷瘤小鼠成瘤模型的抑制作用。
　　方法:
　　1.培養(yǎng)人非小細胞肺癌A549細胞，予以隱丹參酮干預，MTT法檢測細胞生長情況，檢測細胞集落形成情況，FCM檢測細胞周期，Realtime-PCR檢測相關細胞周期調控因子，以及利用Western Blot檢測細胞周期相關蛋白表達及細胞凋亡調控因子。
　　2.構建人非小細胞肺癌荷瘤小鼠模型，移植部位皮下

2、給予隱丹參酮，檢測小鼠生長及成瘤情況，并對腫瘤瘤塊行免疫組化檢測凋亡相關因子原位表達情況。
　　結果:體外人非小細胞肺癌A549細胞模型研究發(fā)現隱丹參酮能抑制腫瘤細胞增殖及細胞集落形成，阻滯腫瘤細胞生長于細胞周期G2/M期，此期的細胞周期蛋白經Western Blot方法檢測提示Cyclin B1、CDK1和CDC25C表達下調、P21CIP1/WAF1表達上升，而細胞凋亡調控因子Bcl-2下降、P53和Bax上調，促使細胞發(fā)生凋

3、亡。Realtime-PCR檢測顯示CCNB1(cyclin B1)、CDK1(CDC2)和CDC25C表達均下調（＜0.5倍），CDKN1A(p21CIP1/WAF1)表達上調（＞2倍）。體內小鼠模型研究發(fā)現隱丹參酮可減緩荷瘤小鼠體重下降，比對照組小鼠精神狀態(tài)好，其瘤體生長速度減緩。病理學檢測提示腫瘤異種移植呈現相對于對照組的低密度浸潤，同時存在有顯著無活力的腫瘤細胞。而TUNEL檢測提示隱丹參酮可促進腫瘤瘤體內的凋亡小體增多。免疫組