細(xì)胞凋亡在強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病機(jī)制中的作用研究.pdf

1、目的：細(xì)胞凋亡與多種自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，其與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、系統(tǒng)性硬化病(SSc)的發(fā)病機(jī)制的作用目前研究的比較深入。強(qiáng)直性脊柱炎(AS)作為免疫相關(guān)的慢性炎性疾病，細(xì)胞凋亡是否參與其發(fā)病，目前研究甚少。本文的研究目的是通過檢測強(qiáng)直性脊柱炎患者外周血和關(guān)節(jié)積液中細(xì)胞凋亡相關(guān)因子FasL(CD178)，TRAIL，sFas的水平情況，探討細(xì)胞凋亡在強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法：患者

2、組50例，其中強(qiáng)直性脊柱炎伴膝關(guān)節(jié)積液30例，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎20例：正常對照20例。強(qiáng)商性脊柱炎患者均符合1984年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者均符合1987年美國風(fēng)濕病學(xué)會(ARA)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，均為初治住院患者，既往均不曾應(yīng)用甲氨蝶呤(MTX)、柳氮磺毗啶(SASP)等慢作用抗風(fēng)濕藥物治療及生物制劑。取20例健康查體者為正常對照?；颊呓M和對照組均留取血清樣本，強(qiáng)直性脊柱炎患者同時留取關(guān)節(jié)液。強(qiáng)直性脊柱炎患者記錄起病部位、查

3、骶髂關(guān)節(jié)CT，所有患者均檢測HLA-B27、血沉、C反應(yīng)蛋白、IgG、IgA、IgM、C3、C4、類風(fēng)濕因子、血常規(guī)，記錄家族史。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法測定血清和關(guān)節(jié)液中sFas和TRAIL的水平并進(jìn)行統(tǒng)計分析；以流式細(xì)胞儀(FCM)檢測強(qiáng)直性脊柱炎患者和正常對照組外周血CD3+CD8+T細(xì)胞表面FasL的表達(dá)水平；并將細(xì)胞凋亡相關(guān)因子FasL、TRAIL、sFas的變化與ESR、CRP等臨床指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。采用SAS

4、8.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行實(shí)驗數(shù)據(jù)處理。所有計量資料數(shù)據(jù)以(x士S)表示，兩組間比較采用t檢驗，相關(guān)性檢驗采用直線相關(guān)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.一般資料的描述：強(qiáng)直性脊柱炎伴膝關(guān)節(jié)積液患者30例，男18例，女12例；HLA-B27陽性25例，陰性5例；平均年齡(23.6±5.31)歲：病程平均(13.77±7.06)月。正常對照組20例，男12例，女8例，平均(24.47±5.73)歲。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者2

5、0例，男12例，女8例，平均(37.1±12.48)歲，病程平均(11.05±5.27)月。AS組與健康對照組在年齡、性別構(gòu)成等方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。強(qiáng)直性脊柱炎組血沉(56.6±17.19)mm/h，C-反應(yīng)蛋白(35.4±15.76)mg/L。骶髂關(guān)節(jié)CT顯示骶髂關(guān)節(jié)破壞程度分級：雙側(cè)II級20例、雙側(cè)III級6例、單側(cè)III級3例、單側(cè)Ⅳ級1例。 2.不同組別血清TRAIL和sFas的水平：AS患者血清中T

6、RAIL水平(29.05±12.17)pg/mL較正常對照組(42.98±14.67)Pg/mL顯著降低(P＜0.05)；AS患者血清sFas水平(3.61±0.72)ng/mL較正常對照組(2.68±0.48)ng/mL顯著升高(P＜0.01)。RA患者血清中sFas的含量(3.55±0.56)ng/mL較正常對照組(2.68±0.48)ng/mL顯著增高(P＜0.01)；RA患者血清中TRAIL的含量(40.37±9.98)pg/m

7、L與正常對照組(42.98±14.67)pg/mL無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。AS患者血清中sFas的含量與RA無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)；ΛS患者血清中TRAIL的含量較RA患者顯著降低(P＜0.05)。 3.AS患者關(guān)節(jié)液TRAIL和sFas的水平：AS患者關(guān)節(jié)液sFas的水平為(4.40±0.82)ng/mL，顯著高于血清水平(P＜0.05)：TRAIL水平為(30.24±12.74)Pg/mL，與血清中含量無顯著性差

8、異(P＞0.05)。 4 AS患者外周血中CD3+CD8+T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(25.8±7.17)％較正常對照組(18.45±6.41)％明顯升高(P＜0.05)；AS患者外周血中CD3+CD8+CD178+細(xì)胞百分?jǐn)?shù)(1.79±0.83)％較正常對照組(0.88±0.36)％明顯增高(P＜0.01)。 5 AS患者血清TRAIL和sFas的水平與實(shí)驗室指標(biāo)相關(guān)性：通過直線相關(guān)性分析顯示，AS患者血清中sFas的水平與ESR、

9、CRP均呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r值分別為0.4929、0.5001，P均＜0.01)；TRAIL水平與ESR、CRP無明顯相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)。 6 AS患者外周血CD3+CD8+T細(xì)胞表面FasL(CD178)的表達(dá)陽性率與實(shí)驗室指標(biāo)相關(guān)性：通過直線相關(guān)性分析顯示，外周血CD3+CD8+T細(xì)胞表面FasL(CD178)的表達(dá)陽性率與ESR、CRP均呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r值分別為0.6372、0.5165，P均＜0.01)。

10、 結(jié)論： 1.AS患者血清抑制凋亡因子sFas有高水平表達(dá)，而促進(jìn)細(xì)胞凋亡的因子TRAIL表達(dá)水平的降低：說明AS患者體內(nèi)存在免疫細(xì)胞凋亡減少，造成免疫功能的紊亂，TRAIL和sFas可能在AS發(fā)病中起著一定作用。RA患者血清中同樣有高水平的sFas表達(dá)，表明sFas與RA的發(fā)病關(guān)系密切。 2.AS患者的炎性外周關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)液中有高水平的sFas，且高于血清水平，提示sFas可能參與了AS外周關(guān)節(jié)滑膜病變、關(guān)節(jié)軟骨破壞。

11、而TRAIL在AS患者血清和關(guān)節(jié)液中無明顯差異。 3.AS患者外周血CD3+CD8+T細(xì)胞表面FasL(CD178)的表達(dá)陽性率與正常對照有顯著差異，提示FasL(CD178)可能在AS的發(fā)病機(jī)制中起一定作用。 4 AS患者血清中sFas水平明顯升高，并與實(shí)驗室活動指標(biāo)ESR、CRP呈正相關(guān)，可為AS病情監(jiān)測提供一定的參考。 5 本文通過對AS患者血清中細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的檢測，有望為應(yīng)用生物制劑治療AS以及新藥的