胃癌中DNA聚合酶β基因T889C突變的檢測和表達.pdf

1、目的分析DNA聚合酶β(DNApolβ)基因在人胃癌細胞系和組織中表達水平，初步探討DNApolβ基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為發(fā)現(xiàn)新的腫瘤標志物，進行早期胃癌篩查提供理論依據(jù)。方法(1)應用PCR-SSCP及PCR-RFLP法檢測12個人胃癌細胞系和107例胃癌組織及其配對正常粘膜中DNApolβT889C突變，分析該突變頻率及分布規(guī)律。(2)構(gòu)建原核表達載體，表達DNApolβT889C的純合突變體及野生體，比較其生物學功能的異同。

2、(3)應用半定量RT-PCR，檢測12個細胞系及大蒜素作用后BGC823中DNApolβ、Recql5基因的表達變化規(guī)律。結(jié)果(1)檢測發(fā)現(xiàn)12個胃癌細胞系中，來源為中國漢族人的四個胃癌細胞系，均為DNApolβT889C突變陽性，而其余8個胃癌細胞系為陰性；107對胃癌組織中，10例癌組織DNApolβT889C突變陽性，突變率為9.3％，配對正常粘膜組織突變陰性。該突變引起其編碼的259位氨基酸由亮氨酸變?yōu)榻z氨酸，導致其二級結(jié)構(gòu)發(fā)生