特異性免疫治療對(duì)哮喘大鼠氣道重塑的影響.pdf

1、目的:1復(fù)制哮喘大鼠模型及特異性免疫治療(SIT)模型。2研究哮喘大鼠IL-13,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)的變化及與氣道重塑的相關(guān)性。3探討特異性免疫治療對(duì)IL-13、TGF-β1的調(diào)控作用及對(duì)氣道重塑的影響。
　　 方法:將清潔級(jí)SD雄性大鼠32只,體重在180至220克之間,隨機(jī)分成四組(每組8只):正常對(duì)照組、哮喘模型組、地塞米松治療組、特異性免疫治療組。哮喘模型組、地塞米松治療組和特異性免疫治療組大鼠分別于第1天

2、和第7天腹腔注射含卵清蛋白(OVA)和氫氧化鋁的混懸液和百日咳疫苗致敏。于第15天將大鼠置于不完全密閉的自制熏箱中霧化吸入OVA,其濃度由1％逐漸增加到1.5％、2％、2.5％、3％,每激發(fā)4次后增加一次OVA濃度,每次30分鐘,隔日一次,共激發(fā)20次。地塞米松組除正常致敏、激發(fā)外,在每次激發(fā)前30分鐘用水溶性地塞米松0.5mg/kg腹腔注射；免疫治療組除33、35、37天于大鼠尾根部皮下分別注射OVA100mg、200mg、400mg

3、外,余與哮喘模型組相同。正常對(duì)照組致敏與激發(fā)均使用生理鹽水。最后一次激發(fā)24小時(shí)后,1％戊巴比妥鈉麻醉動(dòng)物。各組大鼠行肺功能檢測(cè)(檢測(cè)氣道基本阻力和靜脈注射乙酰膽堿后氣道阻力的變化)；肺組織病理切片HE染色,采用計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)測(cè)定支氣管壁內(nèi)周長(zhǎng)、支氣管管壁面積、支氣管平滑肌面積等反映氣道壁厚度的指標(biāo)；Masson染色觀察氣道壁膠原表達(dá)的變化；ELISA法測(cè)定各組大鼠血清中IL-13及TGF-β1的水平。
　　 結(jié)果:

4、　　 1特異性免疫治療對(duì)哮喘大鼠病理的影響:光鏡下可見(jiàn)哮喘模型組、地塞米松組及特異性免疫治療組大鼠氣道粘膜破壞,杯狀細(xì)胞表達(dá)增加,粘液分泌增加,明顯的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),基底膜增厚,平滑肌細(xì)胞增殖,特異性免疫治療組及地塞米松組干預(yù)后上述改變明顯減輕。分析比較各組大鼠氣道管壁面積、平滑肌面積結(jié)果顯示:哮喘模型組(14.56±0.73、6.52±0.54)、地塞米松組(8.36±0.65、3.58±0.58)和特異性免疫治療組(8.45±0.8

5、3、5.57±0.53)氣道管壁面積、平滑肌層面積均大于正常對(duì)照組(6.66±0.49、2.96±0.66)(P<0.05),地塞米松組和特異性免疫治療組氣道管壁面積,平滑肌面積少于哮喘模型組(P<0.05),地塞米松組氣道平滑肌面積少于特異性免疫治療組(P<0.05),地塞米松組氣道管壁面積,略少于特異性免疫治療組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2特異性免疫治療對(duì)哮喘大鼠肺功能的影響:哮喘模型組(1.8492±0.

6、0369)、地塞米松組(1.4403±0.0333)和特異性免疫治療組(1.4349±0.0214)大鼠氣道基本阻力高于正常對(duì)照組(1.1067±0.0196)(P<0.05),特異性免疫治療組和地塞米松組低于哮喘模型組(P<0.05),地塞米松組略高于特異性免疫治療組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)注射乙酰膽堿后哮喘模型組、地塞米松組和特異性免疫治療組氣道阻力變化幅度均大于正常對(duì)照組(P<0.05)；哮喘模型組高于地塞米松組及特

7、異性免疫治療組(P<0.05)。
　　 3特異性免疫治療對(duì)哮喘大鼠膠原沉積的影響(Manssion染色):哮喘模型組(0.0477±0.0036)、特異性免疫治療組(0.0307±0.0020)與地塞米松治療組(0.0271±0.0035)膠原表達(dá)較正常對(duì)照組(0.0191±0.0026)明顯增加(p<0.05)；特異性免疫治療組及地塞米松治療組膠原表達(dá)較哮喘模型組減少(P<0.05)；地塞米松組低于特異性免疫治療組(P<0.0

8、5)。
　　 4特異性免疫治療對(duì)哮喘大鼠血清中TGF-β1的影響:哮喘模型組(68.22±6.79)、地塞米松組(55.64±4.16)及特異性免疫治療組(59.21±7.25)大鼠血清中TGFβ1高于正常對(duì)照組(48.67±4.89)(P<0.05),特異性免疫治療組和地塞米松組低于哮喘模型組(P<0.05),地塞米松組略低于特異性免疫治療組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。TGF-β1與氣道管壁面積、平滑肌層面積成正相關(guān),

9、其相關(guān)系數(shù)分別為:r=0.822 P<0.05,r=0.856 P<0.05。
　　 5特異性免疫治療對(duì)哮喘大鼠血清中IL-13的影響:哮喘模型組(41.69±1.68)、地塞米松組(36.00±1.85)及特異性免疫治療組(36.84±2.22)大鼠血清中IL-13高于正常對(duì)照組(33.84±2.40)(P<0.05),特異性免疫治療組和地塞米松組低于哮喘模型組(P<0.05),地塞米松組略低于特異性免疫治療組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

10、義(P>0.05)。IL-13與氣道管壁面積、平滑肌層面積成正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為:r=0.894 P<0.05,r==0.867 P<0.05,IL-13與TGF-β1成正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為:r=0.901 P<0.05。
　　 結(jié)論:
　　 1哮喘模型組血清中TGF-β1,IL-13水平明顯升高,且與氣道管壁面積、平滑肌層面積成正相關(guān),二者與氣道重塑具有相關(guān)性。
　　 2特異性免疫治療能夠明顯減輕支氣管哮喘氣道