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1、目的: 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀(guān)察維腦路通、精氨酸對(duì)結(jié)腸吻合口愈合的影響,研究吻合口愈合的促進(jìn)因素。 方法: 選用體重200~250g雄性wistar大白鼠15只,所有動(dòng)物都喂以標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)大鼠全價(jià)顆粒飼料,自由飲水,適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境一周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分為三組,每組5只,所有大鼠術(shù)前、術(shù)后各肌注青霉素40萬(wàn)單位。以10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉。維腦路通組:行右半結(jié)腸切除,回腸—橫結(jié)腸端端吻合,用6/0無(wú)損傷
2、線(xiàn),腸吻合口單層內(nèi)翻結(jié)節(jié)縫合4針,用4萬(wàn)單位/100毫升的慶大霉素鹽水2毫升沖洗腹腔,用3/0絲線(xiàn)連續(xù)縫合關(guān)腹,術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始自由進(jìn)食、水,以維腦路通(15mg/kg/d)灌胃,連續(xù)3天;精氨酸組:手術(shù)方法同前,術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始自由進(jìn)食、水,以精氨酸(800mg/kg/d)灌胃,連續(xù)3天。對(duì)照組:手術(shù)方法同前,術(shù)后24小時(shí)自由進(jìn)食、水,不行任何處置,術(shù)后4天分別處死,進(jìn)行剖腹探查。檢查吻合口愈合情況,無(wú)滲漏者,游離結(jié)腸吻合段、切取4厘
3、米(吻合口在節(jié)段的中央),置于林格液中,行吻合口的爆破壓力測(cè)定:將腸段的一端與壓力測(cè)試儀連接,另一端縫接導(dǎo)管。導(dǎo)管另一端連接注射泵,以2ml/min的速度向腸段內(nèi)泵入亞甲藍(lán)注射液,同時(shí)監(jiān)測(cè)腔內(nèi)壓力。當(dāng)發(fā)生亞甲藍(lán)注射液泄漏的腔內(nèi)壓力為吻合口的爆破壓力,做以記錄。這個(gè)參數(shù)表明吻合口的機(jī)械強(qiáng)度(單位mmHg)。再行吻合口羥脯氨酸含量測(cè)定:將爆破壓力測(cè)量后、切除帶有吻合口的1cm腸段100mg,稱(chēng)重,脫脂,脫水,加6mmol/L鹽酸110度水解
4、12小時(shí),使所有氨基酸間肽鍵全部斷裂,取樣后氧化,加入羥脯氨酸顯示劑(10%過(guò)二甲氨基苯甲醛溶液)用紫外分光光度儀測(cè)定組織的羥脯氨酸含量。以微克羥脯氨酸每毫克組織(μg/mg)方式作為結(jié)果的計(jì)數(shù).病理學(xué)檢查:取吻合口處腸管至于10%中性甲醛中固定,常規(guī)石蠟包埋,切片厚度(4μm),蘇木精-伊紅染色,行光鏡檢查膠原細(xì)胞及纖維,比較組間差異。 結(jié)果: 術(shù)后4天,見(jiàn)各組均無(wú)吻合口瘺發(fā)生,可以完成測(cè)壓,精氨酸組、維腦路通組和對(duì)照
5、組吻合口爆破壓力分別為59.800±3.033mmHg、31.200±2.588mmHg和25.200±1.923mmHg三組間兩兩比較,均存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);精氨酸組、維腦路通組和對(duì)照組吻合口組織羥脯氨酸含量分別為6.053±0.227μg/mg,4.420±0.671μg/mg和4.092±0.179μg/mg,三組間兩兩比較,也存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),光鏡下(10或20倍)觀(guān)察見(jiàn)對(duì)照組吻合口膠原細(xì)胞及膠
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