UC-MSCs在CIA大鼠體內(nèi)分布及SDF-1-CXCR4軸對其歸巢影響.pdf

1、目的：課題探索臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesenchymal stem cells，UC-MSCs)在膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎(collagen typeⅡ-induced arthritis，CIA)大鼠體內(nèi)的分布，以及超順磁性氧化鐵納米粒子(Superparamagneticiron oxide nanoparticles，SPION)標(biāo)記下活體示蹤UC-MSCs，初步研究基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1/趨化因子受體4(SDF

2、-1/CXCR4)軸對其歸巢的影響。
　　方法：將SD大鼠(Sprague-Dawley Rats)隨機(jī)分為空白對照組、模型組、單純UC-MSCs治療組、SPION與Brdu標(biāo)記后的UC-MSCs治療組、標(biāo)記后加阻斷劑AMD3100組，除空白對照組外均建立CIA大鼠模型。造模完成一周后治療組、加阻斷劑組大鼠分別經(jīng)尾靜脈注射未標(biāo)記、已標(biāo)記、與阻斷劑AMD3100共培養(yǎng)標(biāo)記后的UC-MSCs懸液。于注射后第1、3、5周在MR下活體觀察

3、、熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescent in situ hybridization，F(xiàn)ISH)檢測UC-MSCs在大鼠患后肢分布，予組織間接免疫熒光法檢測UC-MSCs在各個組織的分布，HE染色評估UC-MSCs對其關(guān)節(jié)病變的影響。用全自動生化儀檢測各組大鼠肝腎功能AST、ALT、BUN、CRE水平變化。Westren Blot檢測SDF-1在大鼠炎癥關(guān)節(jié)部位的表達(dá)，結(jié)合Transwell實(shí)驗(yàn)研究SDF-1/CXCR4軸對UC-MS

4、Cs向損傷部位趨化的影響。
　　結(jié)果：1.模型組CIA大鼠關(guān)節(jié)紅腫活動受限，滑膜炎癥反應(yīng)明顯、關(guān)節(jié)軟骨及骨破壞嚴(yán)重，至移植后第5周無明顯自限性好轉(zhuǎn)，而同期治療組CIA大鼠關(guān)節(jié)腫脹明顯好轉(zhuǎn)，滑膜炎癥反應(yīng)減低。2.UC-MSCs能特異性在CIA大鼠關(guān)節(jié)滑膜炎癥區(qū)域聚集，在大鼠心、肝、脾、肺、腎組織不可見。3.加入阻斷劑AMD3100后UC-MSCs在CIA大鼠關(guān)節(jié)滑膜炎癥區(qū)域不可見。4.移植后第7天，SPION標(biāo)記UC-MSCs治療(

5、SU)組大鼠炎癥膝關(guān)節(jié)SDF-1表達(dá)較空白對照組大鼠顯著增多，此時到達(dá)關(guān)節(jié)炎癥部位的UC-MSCs數(shù)量最多。隨觀察時間延長，SU組大鼠關(guān)節(jié)炎癥處SDF-1表達(dá)減少，到達(dá)關(guān)節(jié)炎癥部位的UC-MSCs數(shù)量隨之減少。5、UC-MSCs及示蹤劑SPION對CIA大鼠組織功能無明顯影響。
　　結(jié)論：1.UC-MSCs受局部炎癥環(huán)境影響能特異性歸巢于損傷關(guān)節(jié)組織，是完成體內(nèi)免疫調(diào)控的重要途徑。2.SDF-1/CXCR4軸是影響UC-MSCs歸