2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩59頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、大豆生物活性肽Lunasin是1987年日本的一個研究小組從大豆中分離鑒定的一個天然多肽,全長43個氨基酸殘基,分子量5kDa。分子內(nèi)含有一個細(xì)胞粘附序列Arg-Gly-Asp (RGD),此序列可與細(xì)胞外基質(zhì)相連;Lunasin的C 末端含有8個天門冬氨酸殘基,此結(jié)構(gòu)與多肽的抗有絲分裂效應(yīng)相關(guān),可以結(jié)合到去乙酰化的染色質(zhì)區(qū)(如,著絲粒),導(dǎo)致有絲分裂中止而最終引起細(xì)胞死亡。研究發(fā)現(xiàn),Lunasin 具有抑制結(jié)腸癌、乳腺癌和前列腺癌的功

2、能。該多肽具有抗炎作用,可以通過抑制NF-κB 通路來抑制炎癥進(jìn)程。由于Lunasin 具有特殊結(jié)構(gòu)和功能,因此對Lunasin的研究具有重要意義。
   Lunasin在天然原料中的含量很低,因此直接提取純化程序復(fù)雜且成本高。所以本研究以Lunasin的基因序列為依據(jù),人工合成基因寡聚核苷酸序列,通過酶切、連接將Lunasin基因克隆到原核表達(dá)載體pET-32a(+)中,得到重組載體pET-32a(+)-Lunasin-6Hi

3、s,然后將重組載體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21(DE3)中。通過對誘導(dǎo)表達(dá)條件的優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)工程菌在30℃,0.05mM IPTG 誘導(dǎo)4h后可溶性表達(dá)。經(jīng)過經(jīng)Sephrose-鎳親和層析柱純化,并由SDS-PAGE和Western Blot 鑒定表達(dá)產(chǎn)物為6kDa的帶六個組氨酸(6His)標(biāo)簽的融合蛋白。并利用巨噬細(xì)胞RAW264.7 檢驗(yàn)其生物活性。通過原核表達(dá)的方法表達(dá)純化Lunasin的優(yōu)點(diǎn)是流程短、操作簡單方便、成本較低、技術(shù)成熟穩(wěn)定

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論