2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本文以富含蛋白的扇貝裙邊為研究對象,研究了海洋抗氧化肽的制備方法和分離純化工藝,對純化的樣品進(jìn)行了氨基酸序列測定和功能基團(tuán)的分析,并對海洋抗氧化肽進(jìn)行體外活性研究,最后制備了海洋抗氧化肽的脂質(zhì)體。
   采用海洋堿性蛋白酶894酶解法制備抗氧化肽,研究了酶解溫度、pH值、酶解時間、加酶量和時間對酶解效果的影響;在單因素實驗的基礎(chǔ)上采用L16(45)正交試驗,根據(jù)Box-Behnken設(shè)計原理采用三因素三水平的響應(yīng)面分析法,對酶解

2、條件進(jìn)行優(yōu)化。最佳酶解條件為:固液比1:3.26,加酶量0.44%,溫度31.20℃,pH9.0,酶解1h,羥自由基清除率為83.78%,與預(yù)測值的相對誤差為0.29%,理論值與預(yù)測值基本一致,預(yù)測模型能較好地反映實際情況。
   經(jīng)過超濾、陰離子交換層析(Q Sepharose Fast Flow)、反相高效液相(KromasilC-18)和高效液相凝膠過濾層析(TSK-GEL G2000SW),純化了扇貝裙邊酶解液中具有抗氧

3、化性的多肽,獲得兩個高純度的抗氧化活性肽SSP-1和SSP-2,并以MALDI-TOF-MS測定了其氨基酸序列。SSP-1分子量1544Da,氨基酸序列為Pro-Val-Asp-Lys-Asn-Ala-Gly-Val-Val-Gly-Ala-Pro-Pro-Lys-Arg-Gly:SSP-2分子量910Da,氨基酸序列為Arg-Gly-Gly-Arg-Gly-Ile-Thr-Asp-Tyr-Leu-Thr。將SSP-1和SSP-2與己知

4、活性肽進(jìn)行序列比對,發(fā)現(xiàn)這兩個抗氧化活性肽均為新的活性肽。最后對兩種肽的巰基、氨基、羧基及酪氨酸進(jìn)行了化學(xué)修飾,發(fā)現(xiàn)酪氨酸是SSP-2的活性必需基團(tuán)。
   對SSP-1的體外活性進(jìn)行了研究。SSP-1具有較強的還原能力和清除羥自由基的能力;SSP-1清除超氧陰離子的能力較高,且具有較高的抗雙氧水氧化的能力,因此認(rèn)為SSP-1具有較強的抗氧化活性。
   最后進(jìn)行了抗氧化肽脂質(zhì)體的制備研究。采用薄膜-超聲分散法,以包封率

5、為指標(biāo),分別考察卵磷脂與膽固醇的質(zhì)量比、溫度、樣品濃度、pH、轉(zhuǎn)速和超聲時間對脂質(zhì)體的影響,在此基礎(chǔ)上采用L9(34)正交設(shè)計進(jìn)行優(yōu)化。制得的納米脂質(zhì)體為單室脂質(zhì)體,平均粒徑為255±60nm,包封率為(58.39±0.34)%,4℃下粒徑穩(wěn)定性無明顯變化。抗氧化肽脂質(zhì)體包封率和穩(wěn)定性較高,重現(xiàn)性好。
   本研究成果為抗氧化肽進(jìn)一步在功能性食品及化妝品領(lǐng)域中的應(yīng)用奠定了一定基礎(chǔ),因而在經(jīng)濟(jì)、社會和學(xué)術(shù)研究等方面將具有重要的意義

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