常染色體顯性Y字縫先天性白內(nèi)障的疾病相關(guān)候選基因定位.pdf

1、[目的]先天性白內(nèi)障是兒童期視力缺損的首要病因之一，其中約8.3-25％的先天性白內(nèi)障發(fā)病與遺傳因素相關(guān)。其遺傳方式可包括常染色體顯性、常染色體隱性及X連鎖遺傳，迄今為止，已發(fā)現(xiàn)與遺傳性先天性白內(nèi)障相關(guān)的25個疾病相關(guān)候選基因和超過35個相關(guān)位點(diǎn)。本實(shí)驗對一個典型Y字縫表型的先天性白內(nèi)障家系進(jìn)行疾病相關(guān)候選基因定位研究。
　　[方法]本實(shí)驗擬研究中國貴州省山區(qū)一個四代的先天性白內(nèi)障家系，共納入該家系成員16人，其中患者8人，男2人

2、，女6人，正常對照成員8人。所有家系成員均接受詳細(xì)病史調(diào)查和眼科檢查，包括視力、裂隙燈、散瞳眼底檢查等，根據(jù)相關(guān)病史、白內(nèi)障手術(shù)史或裂隙燈檢查所見確定成員患病與否。抽取所有成員的外周血樣本，提取基因組DNA，用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增相關(guān)候選基因的編碼區(qū)及內(nèi)含子、外顯子交界區(qū)序列。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行雙向測序，并進(jìn)行序列分析。利用SWISS-MODEL、DEEPVIEW/SWISS-Pdb、pI/MW、Mutation Taster在線預(yù)測軟

3、件分析突變對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、等電點(diǎn)、分子量和功能等的影響。
　　[結(jié)果]裂隙燈下檢查該家系表型為典型Y字縫型白內(nèi)障，伴皮質(zhì)散在點(diǎn)狀混濁。分析家系圖，遺傳方式確定為常染色體顯性遺傳。測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)MIP基因編碼區(qū)一條等位基因的第337位堿基由C變?yōu)門(c.337 C＞T)，導(dǎo)致MIP蛋白在第113位氨基酸處終止編碼(p.R113X)，從而使其結(jié)構(gòu)組成由正常的263個氨基酸變?yōu)?12個氨基酸，該突變在8名健康家系成員和100名正常對照者中均

4、未有發(fā)現(xiàn)。利用SWISS-MODEL、DEEPVIEW/SWIS S-Pdb軟件構(gòu)建正常以及突變MIP蛋白的三維構(gòu)型，經(jīng)pI/MW預(yù)測，MIP蛋白的理論等電點(diǎn)由正常的8.62變?yōu)?.18，分子量由正常的28121Da減小至11956Da，經(jīng)Mutation Taster在線軟件預(yù)測該突變?yōu)榭赡苤虏〖墑e。
　　[結(jié)論]本研究首次證實(shí)了MIP基因第1外顯子中第337位堿基發(fā)生C_＞T改變是與Y字縫型先天性白內(nèi)障共分離的無義突變，提示M