大豆皂甙對(duì)大鼠脂質(zhì)代謝影響的研究.pdf

1、隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,物質(zhì)的豐富,人們生活水平的提高,動(dòng)物性食物攝入增加,膳食結(jié)構(gòu)的變化,高脂血癥已經(jīng)成為一種常見(jiàn)病、多發(fā)病,是誘發(fā)冠心病、動(dòng)脈硬化、腦血管性癡呆、脂肪肝、糖尿病、膽囊炎、肥胖癥、性功能衰退等病癥的重要因素。因此,控制和調(diào)節(jié)血清中總膽固醇(TC),甘油三脂(TG),低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)濃度是預(yù)防和治療高血脂病及其并發(fā)癥的關(guān)鍵。
　　 心腦血管疾病已成為危害人類(lèi)健康和影響社會(huì)勞動(dòng)力的主要疾病,20世紀(jì)初期全

2、球心血管死亡率僅占總死亡率的10％以下,21世紀(jì)初期心血管病死忘率已占發(fā)達(dá)國(guó)家總死亡率的近50％,發(fā)展中國(guó)家的20％。據(jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)每年有300萬(wàn)人死于心血管病。而脂質(zhì)代謝異常,特別是總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白(LDL)或極低密度脂蛋白(VLDL)增高,相應(yīng)的載脂蛋白B(apoB)增高,高密度脂蛋白(HDL)減低,載脂蛋白A(apoA)減低都被認(rèn)為是危險(xiǎn)因素。臨床實(shí)踐中,TC及LDL增高被受關(guān)注。如何有效調(diào)節(jié)血脂,是

3、目前營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。心腦血管疾病的病理基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS),而脂類(lèi)代謝與心血管疾病密切相關(guān),脂質(zhì)代謝紊亂所致的AS是引起心腦血管疾病發(fā)生、發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素。
　　 大豆皂甙(soyasaponin,ss)是從豆科植物中提取出來(lái)的一種五環(huán)三萜類(lèi)皂甙,是一種應(yīng)用價(jià)值廣泛的天然生物活性物質(zhì)。大豆皂甙是從豆科植物中提取出來(lái)的一類(lèi)化學(xué)物質(zhì),由糖和非糖物質(zhì)結(jié)合而成,因其水溶液搖振時(shí)能產(chǎn)生大量持久

4、的蜂窩狀泡沫與肥皂相似而聞名,是一種具有廣泛應(yīng)用價(jià)值的天然生物活性物質(zhì),其分子由低聚糖與齊墩果烯三萜連接而成,即由萜類(lèi)同系物(稱(chēng)為皂甙元)與糖(或糖酸)縮合形成的一類(lèi)化合物[1-3]。文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]大豆皂甙血清中脂質(zhì)的氧化,抑制過(guò)氧化脂質(zhì)的生成并能降低血液中膽固醇和甘油三酯的含量。脂肪細(xì)胞中由腎上腺素誘導(dǎo)的脂質(zhì)化過(guò)程可能是由于大豆皂甙存在而受到抑制。大豆皂甙可抑制ACTH誘導(dǎo)的脂質(zhì)化過(guò)程。金吉淑研究表明[6],當(dāng)體內(nèi)產(chǎn)生過(guò)多活性氧自

5、由基時(shí),各血漿脂蛋白存在著明顯的氧化應(yīng)激,尤其LDL氧化修飾作用增強(qiáng),極易轉(zhuǎn)化為氧化低密度脂蛋白,它是動(dòng)脈粥樣硬化最重要的致病因素。HDL主要通過(guò)體內(nèi)膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)體系來(lái)行使其抗動(dòng)脈粥樣硬化功能,被認(rèn)為是體內(nèi)重要的抗動(dòng)脈粥樣硬化脂蛋白[7]。
　　 最新研究發(fā)現(xiàn)HDL還具有抑制LDL氧化的功能,但被氧化后HDL抗動(dòng)脈粥樣硬化作用減弱,反而轉(zhuǎn)化成致動(dòng)脈粥樣硬化脂蛋白[8]。脂蛋白發(fā)生氧化修飾時(shí),其氧化最初表現(xiàn)在脂蛋白脂質(zhì)成分的過(guò)

6、氧化修飾上,因此在脂蛋白氧化的初期防止其脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化,對(duì)心腦血管疾病的預(yù)防非常重要。大豆異黃酮和皂甙是近年來(lái)研究廣泛的抗氧化成分,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大豆皂甙明顯降低人血漿過(guò)氧化脂質(zhì)水平,尤其能降VLDL、LDL,和HDL過(guò)氧化脂質(zhì)水平,這意味著大豆皂甙經(jīng)過(guò)消化吸收進(jìn)入體內(nèi)仍發(fā)揮其抗氧化活性,增強(qiáng)了人血漿抗氧化能力,阻礙脂蛋白脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化修飾,從而防止其轉(zhuǎn)化為氧化型脂蛋白,此作用有助于動(dòng)脈粥樣硬化的防治。既往研究中SS在降血脂中使用劑量

7、報(bào)道甚少,為探明SS的有效作用劑量,以保證食用的安全性,本研究設(shè)計(jì)以本課題以高脂膳食(飼料)誘發(fā)的高脂血癥大鼠為模型,觀察大豆皂甙對(duì)大鼠血清脂質(zhì)、脂蛋白以及載脂蛋白(apolipoprotein,apo)A、B、C、E的影響,同時(shí)通過(guò)對(duì)血漿前列腺(環(huán))素(prostacyclin,PGI2)、血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)、一氧化氮(nitric oxide,NO)等測(cè)定,從血管內(nèi)皮細(xì)胞活性物質(zhì)、血液流變學(xué),進(jìn)一步

8、探討大豆皂甙干預(yù)在AS防治中的相關(guān)機(jī)制。
　　 本實(shí)驗(yàn)選用60只健康成年SD大鼠(體重260～300g),雌雄各半,隨機(jī)分為5組,分別普通飼料組(正常對(duì)照組ND),高脂飼料組(高血脂模型組HFD),實(shí)驗(yàn)Ⅰ組、實(shí)驗(yàn)Ⅱ組、實(shí)驗(yàn)Ⅲ組。每組12只,大鼠單籠飼養(yǎng),自由攝食和飲水,SS不同劑量組喂養(yǎng)4w和8w后處死動(dòng)物。分別于實(shí)驗(yàn)的中、末期,大鼠在禁食12h后,經(jīng)眼眶靜脈叢和股靜脈取血,制備血清和血漿,并于實(shí)驗(yàn)?zāi)┢谔幩来笫?取肝臟進(jìn)行病理切

9、片觀察。本實(shí)驗(yàn)用酶法測(cè)定了大鼠血清TC、TG、VLDL-TG、LDL-C和HDL-C水平,用免疫比濁法測(cè)定了血清apoA-1、B、C、E含量;并利用HE染色技術(shù)在光鏡下觀察了大鼠肝臟的脂滴沉積情況。在確定SS對(duì)高脂血癥大鼠血脂的調(diào)節(jié)作用后,進(jìn)一步探討其有效劑量對(duì)于抗AS及對(duì)心血管保護(hù)的作用機(jī)制,用放射免疫法測(cè)定血漿PGI2和TXA2含量和硝酸還原酶法測(cè)定血漿NO含量,同時(shí)對(duì)高、中、低切全血粘度(viscosityof whole blo

10、od,WBV)、血漿粘度(plasma specific viscosity,ηp)、血液還原粘度(bloodreduced viscosity,ηp)和紅細(xì)胞壓積(hematocrit,HCT)進(jìn)行測(cè)定,以觀察其對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞活性物質(zhì)及血液流變學(xué)影響:
　　 主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論如下:
　　 1、在大鼠飼料配方中,大鼠基礎(chǔ)飼料組成豆餅20％、小麥粉19％、玉米粉15％、大米粉20％、麩皮15％、魚(yú)粉5％、骨粉3％、酵母1

11、％、食鹽1％、魚(yú)肝油1％。高脂飼料組在基礎(chǔ)飼料上加入2％膽固醇,10％豬油,1％膽鹽,實(shí)驗(yàn)Ⅰ組experimentⅠ)分別在高脂飼料基礎(chǔ)上加入0.05mg/100g大豆皂甙;實(shí)驗(yàn)Ⅱ組(experimentⅡ)在高脂飼料基礎(chǔ)上加入0.10mg/100g大豆皂甙;實(shí)驗(yàn)Ⅲ組(experimentⅢ)在高脂飼料基礎(chǔ)上加入0.15mg/100g大豆皂甙,通過(guò)實(shí)驗(yàn)中期檢測(cè)大鼠血清脂質(zhì)水平,結(jié)果顯示飼喂高脂飼料大鼠血清TC、TG水平均顯著增高,提示高

12、脂血癥大鼠造模成功。
　　 2、在膳食中添加不同劑量大豆皂甙后,各實(shí)驗(yàn)組均能顯著降低高脂血癥大鼠血清TG、TC、VLDL-TG和LDL-C并同時(shí)顯著升高HDL-C水平,有效降低AI值;降低血漿apoB、E并同時(shí)升高apoA-1,有效降低apoB/apoA-1值,提示大豆皂甙通過(guò)對(duì)血中脂質(zhì)、脂蛋白、apo水平的影響,可有效促進(jìn)機(jī)體脂質(zhì)代謝,調(diào)節(jié)血脂紊亂。
　　 3、高脂血癥能明顯影響血管內(nèi)皮細(xì)胞活性物質(zhì)的生成,而SS可顯著

13、降低血漿TXA2和血漿PGI2的含量,提高大鼠和NO含量,提示大豆皂甙改善血管內(nèi)皮功能,有利于AS和CHD的預(yù)防。
　　 4、SS能明顯改善大鼠血液流變學(xué),提示SS通過(guò)提高紅細(xì)胞變形能力,降低紅細(xì)胞聚集性來(lái)改變血液的粘滯狀態(tài),從而達(dá)到降低血液粘度,有效預(yù)防血中脂質(zhì)在動(dòng)脈壁的沉積。
　　 5、高脂血癥組大鼠肝細(xì)胞出現(xiàn)明顯脂肪變性,大豆皂甙能顯著抑制高脂血癥導(dǎo)致的肝細(xì)胞損傷。
　　 6、實(shí)驗(yàn)組0.05mg/100g-

14、0.15mg/100gSS對(duì)高脂血癥均有治療作用,其中,0.10mg/100g和0.15mg/100g對(duì)高脂血癥的治療作用優(yōu)于0.05mg/100g組,而0.10mg/100g和0.15mg/100g之間無(wú)顯著性差異。
　　 綜上所述,SS能顯著降低血清TC、TG、VLDL-TG、LDL-C并升高HDL-C水平,有效降低AI值;降低血漿apoB、apoE并升高apoA-1含量,有效降低apoB/apoA-1值,具有調(diào)節(jié)血脂紊亂作