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1、研究背景與目的:支原體是一類大小介于細(xì)菌與病毒的能在體外培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小的微生物,廣泛存在于動(dòng)物、植物和人類,已確定的對(duì)人類有致病性的支原體主要有7種,它們是肺炎支原體(Mp)、解脲脲原體(Uu)、人型支原體(Mh)、生殖支原體(Mg)、發(fā)酵支原體(Mf)、穿通支原體(Mpe)和梨支原體(Mpi),除Mp以外,其余6種支原體均可通過性傳播而導(dǎo)致男女泌尿生殖系統(tǒng)感染,而后四種因與AIDS的發(fā)展和結(jié)局有關(guān)而被稱為艾滋病相關(guān)支原體。有實(shí)
2、驗(yàn)研究表明支原體具有與HIV復(fù)制有關(guān)的細(xì)胞毒性作用,至少M(fèi)f、Mpe和Mpi能夠增強(qiáng)HIV的復(fù)制,促進(jìn)HIV的細(xì)胞毒作用,導(dǎo)致HIV感染進(jìn)一步發(fā)展。此外,很多可引起粘膜破損的生殖道支原體(如Uu、Mg、Mf等)也可促進(jìn)HIV感染。但是國(guó)內(nèi)外也有學(xué)者提出了相反的觀點(diǎn),認(rèn)為這幾種支原體中的一種或幾種通過抑制HIV的逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)活性或刺激T細(xì)胞提高表達(dá)某些細(xì)胞因子水平以增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能,對(duì)HIV的感染和發(fā)病起到拮抗的作用。針對(duì)兩種完全相反
3、的觀點(diǎn),在國(guó)家自然科學(xué)基金資助下,開展了一系列研究,主要研究目的是:1、了解江蘇地區(qū)男性HIV感染者/AIDS患者Uu、Mh、Mg、Mf、Mpe和Mpi等6種致病性支原體的感染情況;2、了解江蘇地區(qū)男性HIV感染者/AIDS患者機(jī)體的細(xì)胞免疫功能狀況;3、分析致病性支原體與男性HIV感染者/AIDS患者細(xì)胞免疫功能之間的關(guān)系。
研究方法:1、研究對(duì)象包括來自江蘇省南京、常州、蘇州、無錫、南通、泰州、揚(yáng)州、連云港、鹽城、徐州
4、等地區(qū)的男性HIV陽性者和AIDS患者。2、采用流行病學(xué)現(xiàn)況調(diào)查的方法,在調(diào)查對(duì)象知情同意的基礎(chǔ)上,開展問卷調(diào)查,并采集首段尿、靜脈血等樣本。3、用鑒定培養(yǎng)基進(jìn)行Uu與Mh的初步分離和鑒定,并進(jìn)一步經(jīng)過濾培養(yǎng)和特異性PCR試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn);對(duì)艾滋病相關(guān)支原體Mg、Mf、Mpe和Mpi采用套式PCR方法檢測(cè);利用流式細(xì)胞儀及ELISA法檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞(CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞)及Th1/Th2細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、
5、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α)。4、根據(jù)資料類型和分析需要,建立EPIDATA和EXCEL數(shù)據(jù)庫,采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件,結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果和流行病學(xué)調(diào)查資料,選用頻數(shù)分布、中位數(shù)等描述性分析、x2檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn)、單因素、多因素Logistic回歸等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
研究結(jié)果:1、江蘇省男性HIV+/AIDS人群中存在6種支原體的感染,Uu和Mh的檢出率分別為51.7%、34.0%;在309名支原
6、體陽性患者中Uu和Mh合并感染占37.9%,單一Uu陽性者占45.3%,單一Mh感染率為16.8%;艾滋病相關(guān)支原體Mg、Mf、Mpe、Mpe的感染率分別為29.0%、6.6%、1.6%、16.3%。2、江蘇省男性HIV+/AIDS人群中6種支原體的感染存在年齡、地區(qū)、婚姻狀況及職業(yè)間差異;未發(fā)現(xiàn)支原體的感染與艾滋病病毒感染途徑有關(guān)聯(lián);感染HIV的時(shí)間或艾滋病病程越長(zhǎng),支原體的感染率越高。3、江蘇省男性HIV+/AIDS患者中CD4+T
7、細(xì)胞小于200個(gè)/μl有108例,占21.8%,200~499個(gè)/μl有252例,占50.9%;外周血中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α六種細(xì)胞因子含量(ng/ml)的中位數(shù)分別為145.059、1.315、0.420、2.405、4.083、7.157;感染了艾滋病相關(guān)支原體的男性HIV+/AIDS患者外周血的CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)水平以及TNF-α的表達(dá)水平均明顯低于未感染艾滋病相關(guān)支原
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