過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）配體對胃癌細(xì)胞MCG-803生長及基因表達(dá)的研究.pdf

1、目的：研究過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARγ)配體吡格列酮對人胃癌細(xì)胞株MCG-803增殖和凋亡的影響，了解人胃癌細(xì)胞株MCG-803中PPARγ表達(dá)水平及其調(diào)控細(xì)胞生長的可能作用。 方法：采用不同濃度過氧化物酶體增殖物激活受體PPARγ配體吡格列酮分別作用于人胃癌細(xì)胞株MCG-803，分組為：陰性對照組、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L共7組；

2、再應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測24、48、72h時(shí)胃癌細(xì)胞株MCG-803細(xì)胞增殖狀態(tài)。根據(jù)PPARγ配體吡格列酮作用于人胃癌細(xì)胞株MCG-803的濃度不同，分組為：陰性對照組、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L共5組；再利用雙染色(AnnexinV/PI)流式細(xì)胞術(shù)檢測孵育48h時(shí)胃癌細(xì)胞株MCG-803細(xì)胞凋亡率。根據(jù)PPARγ配體吡格列酮作用于人胃癌細(xì)胞株MCG-803的濃度不同，分組

3、為：陰性對照組、0.1μmol/L、10μmol/L、100μmol共4組；進(jìn)一步采用熒光定量PCR法(RT-PCR)測定孵育48h時(shí)PPARγ在胃癌細(xì)胞株MCG-803中的基因表達(dá)。 結(jié)果： 1.MTT法檢測0.01、0.1、1μmol/L吡格列酮孵育人胃癌細(xì)胞株MCG-80324h時(shí)與對照組相比，增殖無明顯影響，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，10、50、100μmol/L吡格列酮?jiǎng)t均可顯著抑制MCG-803細(xì)胞增殖，

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，隨著作用時(shí)間延長到72h，0.1μmol/L組也開始呈現(xiàn)細(xì)胞生長抑制效應(yīng)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，24h時(shí)50μmol/L組增殖抑制作用強(qiáng)于10μmol/L組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，作用48h時(shí)10μmol/L組增殖抑制作用強(qiáng)于1μmol/L組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，72h時(shí)0.1μmol/L組增殖抑制作用強(qiáng)于0.01μmol/L組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)； 2.雙染色(

5、AnnexinV/PI)流式細(xì)胞術(shù)檢測(0.1、1、10、50μmol/L)孵育胃癌細(xì)胞株MCG-803細(xì)胞48h后凋亡率與對照組相比顯著增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01，P=0.001)。隨著吡格列酮濃度增加，細(xì)胞凋亡也增加，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。 3.熒光定量PCR法(RT-PCR)檢測不同濃度吡格列酮(0.1、10、100μmol/L)孵育48h時(shí)PPARγ基因在胃癌細(xì)胞株MCG-803中表達(dá)發(fā)現(xiàn)，隨著吡格列酮藥