過氧化物酶體增殖物激活受體β-δ在小鼠肝癌生成中的作用.pdf

1、研究背景和目的：過氧化物酶體增殖劑激活受體β/δ（PPARβ/δ）屬于配體調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子,在受到配體激動(dòng)劑激活后,與目標(biāo)基因啟動(dòng)子內(nèi)的反應(yīng)元件結(jié)合,從而調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄過程。PARβ/δ配體分為天然配體和合成配體。前者多為不飽和脂肪酸，包括亞油酸、花生四烯酸、棕櫚酸和PGI2等。而后者，目前已知主要有GW0742、L165041、GW501516等。PPARβ/δ具有提高脂肪酸代謝，增加胰島素敏感性，抑制炎癥反應(yīng)，增加肌纖維的氧化以提高運(yùn)

2、動(dòng)表現(xiàn)等作用。然而，在細(xì)胞增殖和癌癥方面，PPARβ/δ作用是促進(jìn)還是抑制作用，目前還存在爭議。本研究意在觀察過氧化物酶體增殖物激活受體β/δ及其配體L165041在小鼠肝癌發(fā)生中的具體作用，并檢測PPARβ/δ在小鼠肝臟中的表達(dá)。
　　方法：設(shè)置包括對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的4個(gè)小組。雄性野生型（PPARβ/δ+/+）小鼠和PPARβ/δ基因敲除（PPARβ/δ-/-）小鼠均于15日齡時(shí)腹腔注射5mg/kg DEN（二乙基亞硝胺），并給予

3、正常飼料或含有L165041(20ppm)藥物的飼料，觀察小鼠活動(dòng)情況、毛發(fā)、體重等，約到8個(gè)月，處死小鼠并提取肝臟、血液，肉眼觀察小鼠肝臟腫瘤生長情況，HE染色用于光鏡下觀察肝臟病理學(xué)改變；用石蠟切片免疫組化技術(shù)（IHC-P）檢測腫瘤組織及癌旁組織中PPAR-β/δ的表達(dá)。
　　結(jié)果：服用L165041藥物的PPARβ/δ-/-小鼠患肝癌的比率為76.9％（實(shí)驗(yàn)組3，10/13）；服用正常飼料的PPARβ/δ-/-小鼠患肝癌率為

4、87.5%（實(shí)驗(yàn)組2，7/8）；而服用L165041藥物的野生型小鼠的患肝癌率為11.1%（實(shí)驗(yàn)組1，1/9），及對(duì)照組的患肝癌率為25%（2/8），對(duì)四組患癌率分別進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，野生型小鼠患肝癌率顯著小于 PPARβ/δ基因敲除小組(P＜0.05)。而濃度20ppm藥物L(fēng)165041并不能顯著抑制或促進(jìn)肝癌的生長。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測PPARβ/δ在野生型小鼠的肝癌和癌旁組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示，PPARβ/δ的表達(dá)部位主要位

5、于胞漿，少部分胞核中也有表達(dá)。PPARβ/δ在肝癌組織中表達(dá)多于癌旁組織，癌旁組織表達(dá)較少。同時(shí)檢測PPARβ/δ-/-小鼠肝組織中PPARβ/δ的表達(dá)，結(jié)果顯示 PPARβ/δ-/-小鼠肝臟中缺乏 PPARβ/δ的表達(dá)，這進(jìn)一步鑒定了野生型小鼠與基因敲除小鼠的基因型。
　　結(jié)論：
　　1.PPARβ/δ具有預(yù)防小鼠肝臟成瘤的作用。
　　2.PPARβ/δ在野生型小鼠的肝臟中的表達(dá)部位主要位于胞漿，少部分胞核中也有表達(dá)