實(shí)驗(yàn)高壓電燒傷肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1動(dòng)態(tài)變化及已酮可可堿的干預(yù)作用.pdf

1、目的:根據(jù)前期所做的實(shí)驗(yàn)研究工作,觀察到實(shí)驗(yàn)高壓電燒傷后動(dòng)物的大體標(biāo)本腸系膜、肝臟、深筋膜、腸黏膜、胃黏膜、腎皮質(zhì)、軟腦膜等的微循環(huán)變化,發(fā)現(xiàn)高壓電不僅引起遠(yuǎn)隔器官的微循環(huán)紊亂,而且還引起外周組織微循環(huán)紊亂,從而導(dǎo)致全身性微循環(huán)障礙,進(jìn)一步引起機(jī)體損傷,微觀的表現(xiàn)可以觀察到白細(xì)胞沿壁翻滾及黏附、白色微小血栓流動(dòng)及紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象等。已有實(shí)驗(yàn)證明黏附分子免疫球蛋白超家族在白細(xì)胞沿壁翻滾及早期黏附中起著重要作用。我們?cè)O(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)觀察高壓

2、電燒傷大鼠免疫球蛋白超家族黏附分子ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1在肺臟組織的連續(xù)變化,進(jìn)一步探討高壓電燒傷微循環(huán)紊亂的機(jī)制,及己酮可可堿對(duì)肺臟組織免疫球蛋白超家族表達(dá)的干預(yù),為高壓電燒傷后微循環(huán)障礙防治提供理論依據(jù),盡最大可能的降低病人的死亡率,提高生存率,為臨床用藥提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組:成年健康雄性SD大鼠(河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,合格證編號(hào)(1010160)180

3、只,隨機(jī)分成三組,分別為高壓電燒傷實(shí)驗(yàn)組(簡(jiǎn)稱實(shí)驗(yàn)組)、高壓電燒傷己酮可可堿(PTX)治療組(簡(jiǎn)稱治療組)與假高壓電燒傷組(簡(jiǎn)稱對(duì)照組),每組各60只。對(duì)照組、高壓電燒傷實(shí)驗(yàn)組和PTX治療組又分別分為電擊前、電擊即刻(15min內(nèi))(T1)、傷后1小時(shí)(T2)、2小時(shí)(T3)、4小時(shí)(T4)、8小時(shí)(T5)6個(gè)不同的時(shí)相,并有空白對(duì)照組,為非電擊非治療組(T0),每組10只。各組分別編號(hào)后分籠飼養(yǎng)。
　　 2實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:大鼠稱重

4、,按大鼠編號(hào)記錄在冊(cè)。將實(shí)驗(yàn)藥品按實(shí)驗(yàn)需要配成所需濃度。
　　 3高壓電燒傷模型復(fù)制:將變壓器及調(diào)壓器正確連接待用,用1％戊巴比妥鈉按40mg/kg給藥麻醉大鼠,待麻醉成功后,給予大鼠左上肢、右下肢及胸部備皮,然后將大鼠仰臥于動(dòng)物絕緣臺(tái)上,四肢伸展固定于高壓輸出電路之間,并分別固定1cm2圓形銅制電極片于大鼠的左上肢、右下肢脫毛區(qū),左上肢為入口,右下肢為出口。接通電源調(diào)整變壓器輸出電壓10千伏,給予實(shí)驗(yàn)組與治療組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別電擊

5、三秒鐘,對(duì)照組給予假電,整個(gè)過(guò)程中無(wú)電流通過(guò),其他條件各組均相同。治療組在電擊后即刻腹腔注射1％PTX(按50mg/kg即5ml/kg給藥),對(duì)照組及電擊組電擊后立即腹腔給予注射5ml/kg生理鹽水。
　　 4標(biāo)本采集與保存:將復(fù)制成功高壓電燒傷大鼠模型麻醉后開(kāi)胸,直視下采左上肺,以肺尖組織為代表,收集0.5cm×0.5cm×0.5cm大小心尖組織,做成石蠟切片,保存待用。
　　 5指標(biāo)檢測(cè):采用免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)

6、電燒傷早期不同時(shí)相肺臟組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達(dá)情況,及己酮可可堿對(duì)三項(xiàng)指標(biāo)的干預(yù)效果。
　　 6實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理:所有計(jì)量資料用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±s)表示,采用兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析(ANOVA)對(duì)實(shí)驗(yàn)得到數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,以p＜0.05為有顯著性差異。
　　 結(jié)果:肺臟組織中ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的變化;
　　

7、 1對(duì)照組組內(nèi)比較無(wú)顯著性差異(p＞0.05)。
　　 2高壓電燒傷后早期實(shí)驗(yàn)組不同時(shí)相肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1水平高于對(duì)照組及電前ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(p＜0.05);其中ICAM-1表達(dá)水平是從電擊后15分鐘開(kāi)始增高,并持續(xù)到8小時(shí);VCAM-1傷后15分鐘開(kāi)始增多,電擊傷后2小時(shí)表達(dá)明顯升高,傷后4小時(shí)即達(dá)到峰值,到傷后8小時(shí)有所降低,但仍未恢復(fù)電擊前水平;PECA-1

8、傷后4小時(shí)表達(dá)量達(dá)高峰,以后隨時(shí)間下降,但到傷后8小時(shí)仍高于對(duì)照組。
　　 3高壓電燒傷后早期PTX治療組不同時(shí)相肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1高于對(duì)照組及電前肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平(p＜0.05),但同一時(shí)相較電擊組肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的水平有不同程度下降;其中VCAM-1的表達(dá)水平傷后8小時(shí)下降明顯,PECAM-1的表達(dá)水平在傷后2小時(shí)下降明

9、顯;大鼠肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1的表達(dá)水平在8小時(shí)時(shí)相治療組與電擊組組間比較有所降低,有顯著性差異(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1實(shí)驗(yàn)高壓電燒傷早期大鼠肺臟組織ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1表達(dá)均有不同程度升高,在造成微循環(huán)障礙方面有重要作用。
　　 2高壓電燒傷早期PTX治療組ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1與實(shí)驗(yàn)組比較明顯降低,但仍高于對(duì)照組,PTX治