高壓電燒傷大鼠血清SOD、MDA的變化及烏司他丁的干預作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:高壓電通過電熱效應、電化學效應及電場力等作用,對機體神經(jīng)、血管、肌肉等組織及器官造成損傷。高壓電燒傷致傷的病理及生理機制尚未完全明了。研究認為,氧化應激參與高壓電對機體的損傷過程。研究表明,燒傷后機體產(chǎn)生大量活性氧(reactive oxygen species,ROS),活性氧通過脂質(zhì)過氧化等反應損傷組織和器官,并與炎癥因子和血管活性物質(zhì)協(xié)同作用,造成氧化應激損傷。高壓電燒傷導致全身氧化應激反應的因素很多,其中血漿超氧化物歧化酶

2、(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)在調(diào)節(jié)氧化應激方面有重要作用。SOD是廣泛存在于生物體的金屬氧化酶,能催化超氧陰離子自由基的歧化反應,通過清除細胞產(chǎn)生的超氧離子而發(fā)揮作用。MDA是脂質(zhì)過氧化反應的產(chǎn)物。目前,關于高壓電燒傷后大鼠血清SOD、MDA定量及定性變化的相關研究較少,本研究檢測高壓電燒傷大鼠血清SOD、MDA含量的變化,并采用烏司他?。║linastati

3、n,UTI)進行干預,旨在探索大鼠高壓電燒傷后血清SOD、MDA的變化規(guī)律,證明氧化應激在高壓電燒傷漸進性損傷發(fā)生和發(fā)展過程中的作用,探索UTI對高壓電燒傷的治療效果。
  方法:
  1.實驗動物分組:本實驗用成年SD大鼠240只,大鼠由河北醫(yī)科大學動物實驗中心提供(合格證編號832457),體重291-362g,按隨機區(qū)組設計法將其隨機分為四組,每組60只,即假高壓電燒傷組(假傷組)、高壓電燒傷組(電傷組)、高壓電燒傷U

4、TI治療組(UTI組)、高壓電燒傷鹽水治療組(鹽水組)。按隨機數(shù)字表法,每組按觀察時相分為電傷前15min、電傷后5min、電傷后1h、2h、4h、8h六個時相組,每一時相組10只大鼠。
  2.實驗前準備:①將實驗大鼠稱重并給予其編號登記;②準備實驗用采血管、采血針等物品,記錄實驗數(shù)據(jù);③按藥品說明配置實驗藥品使其達到實驗所需濃度。
  3.高壓電燒傷動物模型制備:用10%的水合氯醛(0.3ml/100g)溶液注入大鼠腹腔

5、以麻醉實驗大鼠,待麻醉成功后,將麻醉后大鼠仰臥固定于專用的電擊實驗臺上。大鼠左上肢及右下肢脫毛處理,大鼠的左上肢(電流入口)及右下肢(電流出口)分別連接1cm×1cm電極片。將實驗變壓器和調(diào)壓器電線相連接;再接通電源,調(diào)節(jié)調(diào)壓器指針,將升壓器輸出電壓調(diào)至2kV,接通升壓器輸出電源開關,使高壓電流通過大鼠致電擊,持續(xù)電擊3s,高壓電燒傷模型制作完成。將電傷后大鼠分籠放好,待采血。假傷組不予通電,其余處理步驟與電傷組及 UTI組的相同。鹽水

6、組電后5min內(nèi)注射生理鹽水5ml/kg至大鼠腹腔內(nèi),UTI組電后5min內(nèi)注射 UTI(2ml/kg)至大鼠腹腔內(nèi)。每組樣品按時相進行采血、分離血清。
  4.標本采集與保存:將高壓電燒傷大鼠再次麻醉,待麻醉后開胸暴露心臟,于心臟內(nèi)直接抽血取樣,血量約6ml,將抽出的血液注入促凝管中,靜置30min,待血清析出后,放入離心機,調(diào)整轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/min,離心10 min,取上清液置于Eppendorf管中于-70℃條件下保存。<

7、br>  5.指標檢測:采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA),分別檢測每組大鼠的六個時相組血清SOD、MDA含量。
  6.實驗數(shù)據(jù)處理:采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件,行兩因素析因設計的方差分析,多重比較采用LSD法t檢驗。以P<0.05為顯著性檢驗水準。
  結果:
  1.大鼠血清SOD含量變化
  電傷組大鼠血清SOD含量與假傷組差

8、異有顯著性,總體低于假傷組(主效應F=165.245,P<0.05);電傷組血清SOD含量各時相變化差異有顯著性(主效應F=16.905,P<0.05),傷后5min~8h各時相均低于本組傷前值(P<0.05),且呈逐漸降低趨勢,SOD含量在8h時相時達到最低,但電傷組SOD含量仍較假傷組同時相低。
  血清SOD含量UTI組與鹽水組差異有顯著性,總體高于鹽水組(主效應F=31.043,P<0.05);UTI組SOD含量各時相變化

9、差異有顯著性(主效應F=62.830,P<0.05),UTI組SOD含量傷后5min~8h各時相均高于本組傷前值(P<0.05),且呈逐漸降低趨勢。
  2.大鼠血清MDA含量變化
  電傷組血清MDA含量與假傷組差異有顯著性,總體高于假傷組(主效應F=1586.203,P<0.05);電傷組MDA含量各時相變化差異有顯著性(主效應F=126.552,P<0.05),傷后5min~8h呈逐漸增高趨勢,且各時相均高于本組電傷前

10、值(P<0.05)。
  UTI組血清MDA含量與鹽水組差異有顯著性,總體低于鹽水組(主效應F=45.326,P<0.05);UTI組MDA含量各時相變化差異有顯著性(主效應F=246.201,P<0.05),UTI組傷后5min~8h各時相均高于本組傷前值(P<0.05),且呈逐漸增高趨勢。
  結論:
  高壓電燒傷使大鼠血清SOD含量降低、MDA含量升高,誘導高壓電燒傷后氧化應激反應。高壓電燒傷后采用UTI治療,

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