高壓電燒傷大鼠血清GSSG、GR的變化及烏司他丁的干預(yù)作用.pdf

1、目的：高壓電燒傷是一種特殊原因所致的損傷，燒傷后體內(nèi)氧自由基產(chǎn)生增多和（或）機(jī)體抗氧化能力下降所引起的脂質(zhì)過氧化、蛋白氧化、DNA損傷而造成嚴(yán)重的細(xì)胞、組織、器官損害，血清中谷胱甘肽（glutathione, GSH）含量變化是減輕機(jī)體氧化應(yīng)激損傷的關(guān)鍵因素之一。在還原反應(yīng)中，谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase, GPx）通過將GSH作為電子供體使H2O2解毒，并生成終產(chǎn)物氧化型谷胱甘肽（oxidized

2、glutathione, GSSG）。谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase, GR）是將GSSG還原為GSH的催化酶。因此，我們?cè)O(shè)計(jì)本實(shí)驗(yàn)，旨在研究高壓電燒傷早期大鼠血清GSSG、GR變化，并通過烏司他?。╱linastatin, UTI）進(jìn)行干預(yù)，研究燒傷后GSSG、GR的變化機(jī)制，探討UTI治療高壓電燒傷的可行性。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：健康成年SD大鼠（由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，

3、體重291～362g，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（冀）2013-1-003，合格證編號(hào)832457）240只，按隨機(jī)數(shù)字表法分成四組，假高壓電燒傷組（簡(jiǎn)稱：假傷組）、高壓電燒傷組（簡(jiǎn)稱：電傷組）、高壓電燒傷UTI治療組（簡(jiǎn)稱：UTI組）、高壓電燒傷鹽水治療組（簡(jiǎn)稱：鹽水組），每組各60只。每組又按觀察時(shí)間分為電擊前15min、電擊后5min、電擊后1h、2h、4h、8h六個(gè)時(shí)相組，每時(shí)相組10只。
　　2.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：將大鼠編號(hào)、稱重

4、，左上肢、右下肢及前胸脫毛。將實(shí)驗(yàn)藥品按實(shí)驗(yàn)需要配成所需濃度。
　　3.高壓電燒傷模型制作：首先連接好實(shí)驗(yàn)變壓器和調(diào)壓器電線。用10％水合氯醛溶液腹腔注射麻醉大鼠，按40mg/kg給藥，麻醉成功后，將大鼠仰臥于專用電擊實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，固定四肢，將兩個(gè)1cm×1cm電極片分別固定于大鼠的左上肢（電流入口）、右下肢（電流出口）脫毛區(qū)。接通電源后，調(diào)整調(diào)壓器使升壓器輸出電壓至2kV，連接升壓器，使高壓電流通過大鼠，電擊3s。對(duì)照組制作假電傷模

5、型，不合閘通過電流，其余步驟與電傷組一致。電擊5min內(nèi)，UTI組腹腔注射2×104U/kg UTI，鹽水組腹腔內(nèi)注射等量的生理鹽水。
　　4.樣本采集與保存：將高壓電燒傷模型復(fù)制成功的大鼠開胸暴露心臟，直視下心臟抽血6ml，置于一次性使用真空采血管（紅）中，輕輕顛倒數(shù)次后靜置30min，上離心機(jī)，以3000轉(zhuǎn)/min離心10min，紅管中取上清液置于Eppendorf管中在-70℃條件下保存。
　　5.指標(biāo)檢測(cè)：置于冰箱的

6、血清采用ELISA雙夾心抗體法，檢測(cè)GSSG、GR含量。
　　6.數(shù)據(jù)處理：采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件，行兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析。以P＜0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠血清GSSG含量變化
　　電傷組GSSG含量與假傷組相比明顯升高（P＜0.05），且GSSG含量電傷后在一定時(shí)間內(nèi)有顯著差異（P＜0.05），呈上升趨勢(shì)。UTI組GSSG含量總體低于鹽水組（P＜0.05），且GSSG含量治療

7、后在一定時(shí)間內(nèi)有顯著差異（P＜0.05），傷后5min、1h、2h、4h、8h與傷前相比有較明顯明顯差異（P＜0.05）
　　2.大鼠血清GR含量變化
　　電傷組GR含量總體高于假傷組（P＜0.05），且GR含量受傷后隨時(shí)間有顯著差異（P＜0.05），呈增高趨勢(shì)。UTI組GR含量總體低于鹽水組（P＜0.05），且GR含量治療后隨時(shí)間有顯著差異（P＜0.05），UTI組傷后5min～8h各時(shí)相均高于本組傷前值（P＜0.05）<