丹參對氯沙坦藥代動力學(xué)影響及其在中藥與西藥相互作用中的意義.pdf

1、中藥在我國及其他亞洲國家歷史悠久，已經(jīng)被證明對慢性病具有良好的治療優(yōu)勢，具有不良反應(yīng)少、毒性低等特點，在歐美國家逐步受到重視。以往大多數(shù)人認(rèn)為中藥來源于天然植物，安全無毒，也不會像化學(xué)藥一樣易發(fā)生藥物間的相互作用。事實上，中藥含有多種生物活性成分，其化學(xué)組成與化學(xué)合成藥物類似，可通過協(xié)同或者拮抗作用共同發(fā)揮生理調(diào)節(jié)作用，也存在與多種類型的藥物發(fā)生相互作用的可能。以往人們多重視化學(xué)藥物之間的相互作用，最近有關(guān)因中藥和化學(xué)藥相互作用而降低療

2、效和導(dǎo)致毒副反應(yīng)的報道日益增多，已引起了醫(yī)藥界的廣泛關(guān)注。
　　 氯沙坦是第一個用于臨床的非肽類血管緊張素Ⅱ受體阻斷藥，能競爭性拮抗血管緊張素Ⅱ受體中的AT1亞型引起的血管收縮，達(dá)到降低外周阻力治療高血壓的目的。在體內(nèi)，氯沙坦主要是通過CYP450酶中的CYP3A4及CYP2C9介導(dǎo)轉(zhuǎn)化成其活性代謝物EXP3174，二者都能與AT1受體選擇性結(jié)合，發(fā)揮抗血管緊張素Ⅱ的藥理作用，從而產(chǎn)生降壓作用。丹參其主要成分為丹參酮ⅡA和丹酚酸

3、B，由于丹參具有活血化瘀、降低血液粘滯度、改善血管彈性等作用，臨床上常用來配合氯沙坦治療原發(fā)性高血壓，以達(dá)到活血通脈及降壓目的。但是目前對丹參和氯沙坦的研究主要集中在藥效學(xué)領(lǐng)域，而對兩者相互作用的研究較少，因此研究丹參與氯沙坦的相互作用具有一定的臨床意義。本研究擬通過測定大鼠體內(nèi)單用氯沙坦和聯(lián)合使用氯沙坦與丹參及氯沙坦與丹參酮ⅡA，氯沙坦與丹參多酚酸鹽后氯沙坦及活性代謝物EXP3174的藥代動力學(xué)改變情況，明確丹參及其主要成分對氯沙坦和

4、活性代謝物的影響;同時在體外采用RT-PCR和western-blot法測定丹參主要成分（丹酚酸B和丹參酮ⅡA）對CYP3A4和CYP2C9酶mRNA和蛋白水平表達(dá)的影響，在分子水平從CYP450酶活性的角度闡明丹參與氯沙坦之間相互作用的關(guān)系。
　　 本文建立了氯沙坦及代謝物EXP3174在大鼠血漿中的定量分析方法，方法學(xué)考察均符合要求，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾樣品峰，含量測定方法簡便可靠，適合于生物樣品成分的含量測定，并成功用于

5、氯沙坦與丹參片合并用藥后藥代動力學(xué)的相互作用研究。實驗分為一次給藥組和長期給藥組，其中長期給藥組給予丹參片，丹參酮ⅡA及丹參多酚酸鹽14天，再給予氯沙坦。SD大鼠隨機(jī)分為4組:A組單獨灌胃給藥氯沙坦片混懸液;B組灌胃給藥氯沙坦片和丹參片混懸液;C組灌胃給藥氯沙坦片和丹參酮ⅡA混懸液;D組灌胃給藥氯沙坦片和丹參多酚酸鹽混懸液，于氯沙坦給藥后在不同時間點從大鼠眼眥靜脈叢取血，高效液相色譜-質(zhì)譜法測定大鼠血漿中氯沙坦和代謝物EXP3174的濃

6、度，采集血藥濃度-時間數(shù)據(jù)，計算其主要藥代動力學(xué)參數(shù)，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果顯示:一次給藥結(jié)果表明，氯沙坦和丹參片聯(lián)用組與氯沙坦單獨用藥組相比較，藥代動力學(xué)參數(shù)(Tmax，t1/2，AUC0-24，AUC0-∞，Vd and CL)均有顯著性差異(p＜0.05)，藥物聯(lián)用后能夠降低氯沙坦原型藥的半衰期清除率及表觀分布容積并延長達(dá)峰時間，說明在大鼠體內(nèi)，丹參或其活性成分能夠加快氯沙坦代謝，而代謝物EXP3174的藥代動力學(xué)參數(shù)與單用藥相比

7、均無顯著性差異，說明氯沙坦經(jīng)過聯(lián)用后對代謝物的影響并不明顯。長期給藥組結(jié)果表明:藥物經(jīng)過聯(lián)用后能夠降低氯沙坦原型藥的達(dá)峰濃度、半衰期、清除率及表觀分布容積，說明在大鼠體內(nèi)，丹參或其活性成分能夠誘導(dǎo)氯沙坦代謝。代謝物EXP3174的藥代動力學(xué)參數(shù)與單用藥相比，半衰期延長，表觀分布容積增加表明丹參片對氯沙坦有一定的誘導(dǎo)作用。長期給藥結(jié)果與單次給藥結(jié)果相似，表明丹參片能夠影響氯沙坦在體內(nèi)的代謝，且這種影響是一種誘導(dǎo)作用。本文在中西藥聯(lián)合用藥的

8、藥代動力學(xué)研究的同時，采用Chang Liver細(xì)胞為研究模型，進(jìn)行中藥有效成分對藥物代謝酶系統(tǒng)影響的研究，在細(xì)胞水平闡明丹參制劑影響氯沙坦代謝的分子基礎(chǔ)。研究在Chang Liver細(xì)胞中分別加入不同濃度的丹參酮ⅡA(1，10，100μM)和丹酚酸B(1，10，100μM)，用PCR和western-blot法測定CYP3A4和CYP2C9的mRNA和蛋白表達(dá)的情況。結(jié)果顯示:丹參酮ⅡA和丹酚酸B作用于Chang Liver細(xì)胞48小

9、時后，能誘導(dǎo)細(xì)胞中CYP3A4和CYP2C9的mRNA及蛋白表達(dá)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)，且誘導(dǎo)作用呈濃度依賴性。
　　 本課題以傳統(tǒng)中藥丹參和西藥氯沙坦為研究示范，綜合運用藥代動力學(xué)，分子生物學(xué)等多學(xué)科手段，將整體分析（中西藥聯(lián)合用藥的藥代動力學(xué)研究）和分子水平分析（中藥有效成分對藥物代謝酶系統(tǒng)影響的研究）相結(jié)合，從分子-細(xì)胞-整體動物水平，創(chuàng)新構(gòu)建基于CYP450酶的系統(tǒng)研究方法，研究丹參制劑對氯沙坦代謝水平的影