隱丹參酮在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、目的及內(nèi)容:該實驗作為隱丹參酮Ⅰ類新藥開發(fā)的一部分,目的在于建立檢測動物體內(nèi)隱丹參酮濃度的方法,并運用該方法研究大鼠口服隱丹參酮純品及不同隱丹參酮制劑的藥代動力學(xué)行為,為藥物的臨床前研究提供實驗數(shù)據(jù).實驗分為四個部分:(1)建立檢驗大鼠生物樣本隱丹參酮濃度的快速、靈敏、穩(wěn)定性好的HPLC法;(2)大鼠口服隱丹參酮的相對生物利用度的研究;(3)幾種隱丹參酮制劑的篩選;(4)大鼠口服低、中、高三個劑量隱丹參酮的藥時曲線.3.方法:HPLC法

2、以氟西汀(fluoxetine FXT)為內(nèi)標,依利特C18色譜柱(4.6×150mm,5 μ m)作為固定相,流動相為72％的甲醇,28%的硼酸/氯化鉀緩沖液(PH=9.4),流速1.2ml/min,紫外檢測波長270nm.取大鼠血漿或組織勻漿,按比例加入2.0mg/ml vitC溶液以抗氧化,加入內(nèi)標渦旋后,加入三倍體積乙醚,靜置后離心,吸取上清液.室溫下真空揮干,甲醇水溶液溶解殘渣,去蛋白處理后進樣.選用SD大鼠進行隱丹參酮純品的

3、相對生物利用度研究,大鼠分別腹腔注射及口服隱丹參酮純品后于不同時間點從尾尖采血,通過比較藥代動力學(xué)參數(shù)探討隱丹參酮純品在大鼠體內(nèi)是否存在吸收;接著用同樣的方法進行了3種隱丹參酮制劑的篩選,最后篩選出吸收最佳的制劑(2＃)進行大鼠口服三個劑量組隱丹參酮制劑的實驗.SD大鼠于實驗前一天乙醚麻醉,行右側(cè)頸靜脈插管手術(shù),禁食12小時后于次日按低、中、高三個劑量組口服給藥,給藥后不同時間點由右頸靜脈插管取血.每次取血后立即于插管處補充與取血量相當

4、的肝素生理鹽水或新鮮血液.采集的血樣置于肝素化EP管中加入一定量的抗氧化劑,分離血漿,-20℃保存至處理.結(jié)論:該實驗建立了一種良好的HPLC方法用于測定大鼠生物樣本中隱丹參酮的濃度,該分析方法靈敏準確、重復(fù)性好、可信性高、簡便且易于推廣,能滿足藥物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)的研究.隱丹參酮純品口服給藥在體內(nèi)存在吸收但生物利用度較低且吸收不規(guī)則;進行制劑改良后,2＃制劑的體內(nèi)吸收最優(yōu).大鼠口服2＃制劑的血漿藥物濃度-時間曲線呈雙峰特征;隱丹