Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良遺傳家系TGFBI基因突變研究.pdf

1、目的:
　　1.采集 Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良(Reis-bucklers Corneal Dystrophy, RBCD)遺傳家系臨床信息,建立電子檔案資料及DNA標(biāo)本庫。
　　2.分析Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良遺傳家系的臨床表型和遺傳學(xué)特征
　　3.對Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良候選基因TGFBI的所有外顯子進(jìn)行基因測序,確定致病基因突變位點(diǎn)。
　　方法:
　　1.收

2、集一個(gè)3代共18名成員的Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良家系,并命名為HN-SY-001家系,其中9人被確診為RBCD。采集該病史資料,填寫RBCD調(diào)查表、簽署參與研究相關(guān)知情同意書,繪制家系圖譜。對家系內(nèi)所有成員進(jìn)行系統(tǒng)的眼部病史和系統(tǒng)疾病回顧,進(jìn)行眼部?？茩z查和必要的系統(tǒng)檢查。眼部檢查包括視力、矯正視力、眼壓、角膜、隙燈檢查、角膜照相以及淚液分泌檢查和角膜敏感性檢查。
　　2.抽取患者及家系內(nèi)正常成員外周血8-10ml,

3、提取DNA。應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymeasreehaineraction,PCR)和 Sanger直接測序方法,對該家系全部現(xiàn)存活成員的TGFBI基因的所有16個(gè)外顯子區(qū)域進(jìn)行致病基因突變位點(diǎn)的篩查。發(fā)現(xiàn)可疑陽性位點(diǎn)后,與千人數(shù)據(jù)庫和 ensemble數(shù)據(jù)庫等進(jìn)行比對,并且將該位點(diǎn)在100個(gè)家系之外的無親緣關(guān)系的正常人中進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。
　　結(jié)果:
　　1.建立了科學(xué)、規(guī)范,符合遺傳資源采集研究原則要求的Reis-Bu

4、cklers角膜營養(yǎng)不良遺傳家系臨床資料和數(shù)字檔案數(shù)據(jù)庫及DNA標(biāo)本庫。
　　2. HN-SY-001家系患者9例診斷為Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良,發(fā)病年齡1~10(3.67±0.90)歲,首發(fā)癥狀包括畏光流淚,眼睛疼痛。視力下降年齡6~13(8.00±0.78)歲。個(gè)體患者主要表現(xiàn)為角膜上皮地圖樣缺損、淺基質(zhì)層孤島樣變性混濁、角膜表面鐵銹樣色素沉積和深部角膜基質(zhì)層水腫。所有患者角膜敏感度都有減弱甚至消失。
　　

5、3. Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良家系患者在TGFBI基因第4外顯子編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)雜合錯(cuò)義突變c.418G>T(p. R124L),該突變在家系內(nèi)表型共分離,并在100個(gè)無親緣關(guān)系的正常人中不存在該突變位點(diǎn)。
　　結(jié)論:
　　1.該家系由TGFBI基因c.418G>T突變引起的RBCD患者存在顯著表型異質(zhì)性。且和以往報(bào)道的不同,患者的水腫等病變累及全基質(zhì)層。
　　2. Reis-Bucklers角膜營養(yǎng)不良家系符