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文檔簡介
1、背景和目的血管瘤是嬰幼兒時期常見的良性腫瘤,其自然病程較為特殊,大多數(shù)血管瘤有一明顯的早期快速增生期和緩慢的自行消退期,目前其發(fā)生發(fā)展和消退的演變機制尚不明確,治療效果也非十分理想。近年來血管瘤自行消退的機制備受關注,對其自行消退機制的揭示將有助于尋找一條新的更為安全有效的治療途徑。已有越來越多的研究表明細胞凋亡的存在與血管瘤的自行消退過程密切相關,部分凋亡相關因子在其中可能發(fā)揮了一定的調(diào)控作用。腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(tumor
2、necrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)是新近發(fā)現(xiàn)的介導細胞凋亡的信號分子,至今己發(fā)現(xiàn)5種受體,包括兩種死亡受體(deathreceptor,DR)即TRAIL-R1(DR4)、TRAIL-R2(DR5),兩種誘騙受體(decoyreceptor,DcR)即TRAIL-R3(DcR1)、TRAIL-R4(DcR2)以及可溶性受體OPG(osteoprotegerin)。T
3、RAIL有兩種存在形式,即膜結(jié)合型和可溶性,與死亡受體結(jié)合后均可選擇性地誘導腫瘤細胞和轉(zhuǎn)化細胞的凋亡,而對正常細胞無明顯殺傷作用。由于TRAIL已在多項動物實驗及體外實驗顯示出良好的抗腫瘤效應且具有明顯的安全性,其在腫瘤治療中的作用愈來愈受到重視,應用重組TRAIL進行腫瘤治療已成為研究熱點之一。 至今TRAIL及其受體在多種腫瘤組織上的表達已見報道,其差異性表達與部分腫瘤的生物學行為和預后有關,但TRAIL在血管瘤中的研究尚不
4、多見,有關其死亡受體及血清可溶性TRAIL(solubleTRAIL,sTRAIL)在血管瘤中的研究未見報道,本實驗擬通過檢測血清sTRAIL、組織中TRAIL及DR4、DR5蛋白在皮膚血管瘤不同階段的表達,同時檢測瘤體組織中細胞凋亡情況,旨在初步探討凋亡相關因子TRAIL與細胞凋亡的關系及其在血管瘤自行消退過程中的可能作用。 材料與方法組織標本:選用手術切除的皮膚血管瘤標本42例,根據(jù)Mulliken等的血管瘤組織學分期標準并
5、結(jié)合疾病的臨床生物學行為將其分為增生期血管瘤和消退期血管瘤兩實驗組,另取20例正常皮膚標本作為對照。①應用免疫組織化學技術檢測TRAIL及DR4、DR5蛋白的表達。②應用流式細胞術(flowcytometer,FCM)檢測TRAIL的相對含量。③分別應用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的缺口末端標記技術(terminal-deoxynucleotidy1transferasemediatednickendlabeling,TUNEL)和FC
6、M檢測細胞凋亡情況,并分析血管瘤組織中TRAIL蛋白含量與細胞凋亡的關系。 血清標本:來源于與組織標本相同的血管瘤病例,分組同組織標本,分為增生期血管瘤和消退期血管瘤兩實驗組,另選用20例健康人血清作為對照。應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)檢測血清sTRAIL水平。 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析,顯著性水準α=0.05。 結(jié)論:1
7、.細胞凋亡存在于血管瘤的各個階段,在由增生期轉(zhuǎn)變?yōu)橄似诘倪^程中出現(xiàn)了細胞凋亡的上調(diào),提示細胞凋亡可能參與了血管瘤的自行消退過程。 2.TRAIL蛋白及其死亡受體DR4、DR5在不同階段血管瘤組織中存在差異性表達,在血管瘤消退期,促凋亡因子TRAIL及其死亡受體DR4、DR5的表達水平升高,提示TRAIL可能通過與DR4、DR5結(jié)合參與了血管瘤由增生期轉(zhuǎn)變?yōu)橄似诘倪^程。 3.TRAIL蛋白的表達水平與細胞凋亡水平呈正相
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