增強樹突狀細胞向淋巴結(jié)遷移能力對乳腺癌DC疫苗免疫治療作用的影響.pdf

1、在腫瘤免疫過程中，T淋巴細胞介導的免疫應答起著主導作用，DCs是目前功能最強的抗原遞呈細胞(APC)，能刺激初始T淋巴細胞增殖，激發(fā)機體免疫應答。由此，以DCs為基礎的腫瘤免疫治療越來越受到重視，并有較深入的研究。DCs攝取腫瘤抗原后從腫瘤部位到淋巴組織的遷移是有效激發(fā)抗腫瘤免疫反應關鍵步驟。本研究嘗試通過使負載乳腺癌抗原DCs表面的CCR7表達上調(diào)或?qū)ε潴w的敏感性增強，以期在DCs注入體內(nèi)后，能有效遷移到達淋巴組織，充分發(fā)揮乳腺癌DC

2、s疫苗的免疫治療作用。 1、增強負載乳腺癌抗原小鼠骨髓來源樹突狀細胞(BMDCs)遷移能力的體外實驗研究 [目的]上調(diào)體外培養(yǎng)乳腺癌抗原負載的BMDCs表面CCR7表達，觀察對其遷移能力和功能的影響。 [材料與方法]在體外以rmGM-CSF和rmIL-4誘導培養(yǎng)BALB/c小鼠BMDCs，負載乳腺癌抗原后，加入不同的刺激物培養(yǎng)，觀察CCR7表達情況，并檢測表型及其功能的變化。 [結(jié)果]PGE2和LTC4組

3、BMDCs與DC對照組相比，CD86、CD80、CCR7陽性細胞百分率升高，而且CCR7mRNA和蛋白表達增強(P＜0.05)，對CCL19或CCL21趨化遷移能力增強(P＜0.05)；Bryo-1組BMDCs與對照組相比，CD86、CD80表達水平上調(diào)，CCR7mRNA表達增強(P＜0.05)，但在CCR7蛋白表達和細胞遷移能力中未顯示出優(yōu)勢(P＞0.05)。經(jīng)PGE2、LTC4及Bryo-1培養(yǎng)的BMDCs與對照組相比，對淋巴細胞的

4、增殖能力無統(tǒng)計學差異；激活的CTL細胞特異性殺傷活性不受影響，隨效靶比的增大，其殺傷乳腺癌細胞活性隨之增加。 [結(jié)論]PGE2和LTC4可以促進BMDCs成熟，并通過CCR7mRNA和蛋白表達上調(diào)，增強其趨化遷移能力；而Bryo-1僅能促進BMDCs成熟。 2、體外培養(yǎng)小鼠骨髓來源樹突狀細胞體內(nèi)抗乳腺癌免疫治療作用的動物實驗研究 [目的]觀察上調(diào)體外培養(yǎng)乳腺癌抗原負載的BMDCs表面CCR7表達，在小鼠體內(nèi)對乳腺

5、癌免疫治療作用的影響。 [材料與方法]構(gòu)建BALB/c小鼠乳腺癌動物模型，用體外誘導培養(yǎng)并負載乳腺癌抗原的各組BMDCs，接種治療，1×106個/只/周，連續(xù)4周，每周測量腫瘤大小。 [結(jié)果]根據(jù)腫瘤每周的平均體積變化情況，BMDCs治療各組腫瘤生長速度均比PBS對照組慢，經(jīng)PGE2和LTC4培養(yǎng)DC組抑制腫瘤生長的作用高于DC組(P＜0.05)，而Bryo-1組的抑制作用與DC組相似(P＞0.05)。第8周種植腫瘤的重

6、量5組也有差異(P＜0.05)，PGE2和LTC4組平均腫瘤重量低于DC組(P＜0.05)。 [結(jié)論]以PGE2或LTC4培養(yǎng)BMDCs可以提高乳腺癌DCs疫苗的功效，更好發(fā)揮免疫功能，作用機制可能是促進BMDCs表面CCR7表達，使其在體內(nèi)遷移能力增強。 3、調(diào)控負載乳腺癌抗原人外周血單核細胞來源DCs(MoDCs)的遷移能力[目的]體外培養(yǎng)乳腺癌抗原負載的人MoDCs，使其表面CCR7表達上調(diào)，觀察其在體外遷移能力。

7、 [材料與方法]用rhGM-CSF和rhIL-4培養(yǎng)MoDCs，負載乳腺癌抗原后，分別加入PGE2、LTC4或Bryo-1培養(yǎng)，檢測其表型及其功能變化。 [結(jié)果]體外實驗顯示，3組不同培養(yǎng)條件，不影響MoDCs的刺激淋巴細胞增殖能力和自體特異性淋巴細胞殺傷活性。與對照組MoDCs相比，PGE2和LTC4組CD86表達增高，可以上調(diào)CCR7mRNA和蛋白表達(P＜0.05)。體外趨化試驗顯示，PGE2可以使MoDCs對其配