細(xì)胞膜微粒對血管內(nèi)皮細(xì)胞功能影響的研究.pdf

1、研究目的： 通過細(xì)胞膜微粒和血管內(nèi)皮細(xì)胞共同培養(yǎng)的方法，進一步研究細(xì)胞膜微粒對血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，特別是細(xì)胞活性和凋亡的影響，探討細(xì)胞膜微粒在激素相關(guān)性股骨頭缺血壞死(avascular necrosis of femoral head，ANFH)的發(fā)生機制中所起的作用。 研究方法： 實驗對象：實驗中選擇體外培養(yǎng)的第三代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)作為研究對象。實驗刺激物：在細(xì)胞培養(yǎng)基中分別加入健康人、激素誘導(dǎo)股

2、骨頭壞死患者、酒精誘導(dǎo)股骨頭壞死患者和和使用大劑量激素治療患者血液中分離出的富含細(xì)胞膜微粒的血漿。 檢測方法：細(xì)胞膜微粒和內(nèi)皮細(xì)胞共同培養(yǎng)一段時間后倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，并用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞培養(yǎng)基中膜微粒種類和數(shù)量的改變，用CD62E+/CD31+表示內(nèi)皮細(xì)胞活性。RT-PCR檢測內(nèi)皮細(xì)胞凋亡基因的表達，用fas/beta-actin表示細(xì)胞凋亡基因的程度。 結(jié)果： 1．倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞：發(fā)現(xiàn)

3、各組內(nèi)皮細(xì)胞的形狀、密度、生長速度和細(xì)胞核的形態(tài)沒有明顯差異。 2．流式細(xì)胞儀分析：共培養(yǎng)48小時后，培養(yǎng)基中細(xì)胞膜微粒數(shù)量和種類變化：使用激素的實驗組CD62E+/CD31+明顯低于對照組(P=0.035)，其他各實驗組和對照組無明顯差異(P>0.05)。 3.RT-PCR分析凋亡基因：激素性ANFH的實驗組fas/beta-actin明顯高于對照組(P=0.006)。使用激素的實驗組高于對照組(P=0.005)。其余