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文檔簡介
1、目的: 1.以腸道十四種優(yōu)勢菌群變化情況為依據(jù),建立輕度菌群失衡和重度菌群失衡小鼠模型。 2.研究腸道菌群失衡對(duì)小鼠腸粘膜機(jī)械屏障的影響,探討優(yōu)勢菌群與腸道粘膜屏障的相互作用機(jī)制。 方法: 1.采用抗生素頭孢曲松鈉灌胃的方式建立小鼠腸道菌群失衡模型。以頭孢曲松鈉終濃度5g/kg/d的劑量,連續(xù)8天,取盲腸內(nèi)容物進(jìn)行腸道菌群分析,建立小鼠輕度菌群失衡模型;以頭孢曲松鈉終濃度8g/kg/d的劑量,連續(xù)8天,分
2、析腸道菌群,建立小鼠重度菌群失衡模型。 2.利用HE染色及電鏡技術(shù)觀察正常組、輕度菌群失衡組、重度菌群失衡組小鼠腸道粘膜絨毛形態(tài)變化,用ELISA法檢測腸粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌量變化,RT-PCR技術(shù)及免疫組化法檢測腸粘膜粘液素Mucin2、Mucin3,防御素含量的變化。 結(jié)果: 1.頭孢曲松鈉5g/kg/d,連續(xù)8天灌胃,腸道優(yōu)勢菌群顯著下降,建立輕度菌群失衡小鼠模型;頭孢曲松鈉8g/kg/d,連續(xù)
3、8天灌胃,腸道優(yōu)勢菌群的數(shù)量幾乎降至零,建立重度菌群失衡小鼠模型。 2.菌群失衡小鼠腸粘膜絨毛出現(xiàn)腫脹、斷裂,絨毛頂端腸上皮細(xì)胞壞死、脫落,細(xì)胞間間隙增寬,胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡結(jié)構(gòu),粘膜及粘膜下層有淋巴細(xì)胞浸潤,重度菌群失衡與輕度菌群失衡小鼠相比較絨毛結(jié)構(gòu)受損加重。 3.菌群失衡小鼠小腸段腸粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌水平下降,重度菌群失衡組與正常組比較下降呈顯著變化(P<0.05),與輕度菌群失衡組相比下降明顯。
4、 4.菌群失衡小鼠粘液層中的粘液素Mucin2、Mucin3、防御素在mRNA水平的表達(dá)與正常小鼠相比明顯增強(qiáng),在杯狀細(xì)胞胞漿內(nèi)Mucin2蛋白陽性表達(dá)增強(qiáng),且重度菌群失衡組與輕度菌群失衡組小鼠比較,粘液素Mucin2、Mucin3、防御素增強(qiáng)明顯。 結(jié)論:抗生素干擾腸道優(yōu)勢菌群,建立腸道菌群失衡模型。菌群失衡可導(dǎo)致腸道機(jī)械屏障粘膜絨毛結(jié)構(gòu)受損,腸粘膜免疫水平下降,SIgA分泌量隨菌群失衡程度呈下降趨勢,同時(shí)引起粘液層中粘液素和
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