酶法制備高含量二亞油酰磷脂酰膽堿的研究.pdf

1、磷脂酰膽堿(PC)是人體細胞膜的基本構成成分，對于維持生物膜的生理活性和機體的正常代謝起關鍵作用。二亞油酰磷脂酰膽堿(DLPC)作為其中的主要活性成分，在生物化學和細胞生理學方面都具有十分重要的意義。它具有促進肝細胞的再生、減輕肝細胞脂肪變性和壞死、改善血液和肝臟的脂質代謝以及防治肝硬化和肝纖維化等功能，從而保護肝細胞免受損害。
　　 為了提高大豆PC中DLPC含量，本研究以固定化脂肪酶Lipozyme TL IM為工具酶，于正

2、庚烷體系中催化大豆PC與亞油酸(LA)酸解反應。首先，實驗對脂肪酶及其反應介質作出篩選，最終確定正庚烷體系下脂肪酶Lipozyme TL IM催化酸解反應。然后以產品LA含量作為考察指標，探討PC濃度(PC/正庚烷，g/mL)、底物比(LA/PC，g/g)、酶添加量(以底物總質量為基準，％)、水分添加量(以溶劑體積為基準，μL/mL)、反應時間(h)、反應溫度(℃)對酸解反應的影響，并結合Plackett-Burman設計法對這六個因素

3、進行研究，篩選出底物比、反應溫度和酶添加量為主要的影響因子。在此基礎之上，通過響應曲面法對底物比、反應溫度和酶添加量的最佳水平及其交互作用作進一步考察以優(yōu)化反應條件。通過逐步回歸分析建立二次多項式模型，利用方差分析對該模型進行了顯著性檢驗，最終獲得的最佳反應條件為：PC濃度，0.25g/mL；底物比,2.81；酶添加量,23.92％；反應溫度，61.57℃；反應時間,48h；水分添加量,3μL/mL，該條件下得到的產品經GC檢測得其LA