瑞士乳桿菌發(fā)酵牛乳產(chǎn)肽對小鼠巨噬細胞免疫活性的影響.pdf

1、瑞士乳桿菌是制作發(fā)酵型牛乳或牛乳制品常用的一種乳桿菌，近年來發(fā)酵乳中活性成分的研究一直深受食品界的青睞，其中活性小肽的研究尤為熱門。
　　本實驗從兩方面探究了瑞士乳桿菌發(fā)酵牛乳產(chǎn)生的各類小肽的對BALB/C小鼠巨噬細胞免疫學(xué)活性的影響，最后分離純化出兩個有免疫學(xué)活性的小肽并且測定了它們的序列。過程如下：
　　1.從三株瑞士乳桿菌（CICC6024、JCM1120、LH0906）中篩選出發(fā)酵活力最強的CICC6024菌株作為發(fā)

2、酵用株。
　　2.用CICC6024菌株發(fā)酵6L脫脂乳，經(jīng)過離心、超濾步驟后，制得分子量在3kD以下的小肽上清1.5L，其中0.5L凍干成干粉備用。反相高效液相色譜分離小肽上清，按峰收集其中的6個主要的色譜峰，凍干制得6個單峰小肽的干粉（按洗脫順序依次標(biāo)記為A、B、C、D、E、F）。
　　3.以2中制得的3kD小肽原液和6個單峰小肽溶液為刺激物，做巨噬細胞的吞噬實驗和NO分泌實驗，驗證其活性。實驗結(jié)果顯示，3kD小肽原液以及

3、峰A、峰B均能增強小鼠巨噬細胞的吞噬能力，所有組別NO分泌量沒有顯著差異。
　　4.使用電噴霧四極桿飛行時間質(zhì)譜(ESI-Q-TOF-MS)的方法對具有活性的小肽A和B進行測序，測序結(jié)果為, A：His-Asn-Ala-Asn(M=454), B:Ser-Leu-Pro-Gln(M=443).此兩序列尚未在NCBI登記。
　　本實驗建立的發(fā)酵乳上清中小肽含量的測定方法以及按照疏水性分離純化小肽的方法都具備一定的創(chuàng)新性，為本課