胰島素親和配基的固相合成與分離應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文以機械強度高、非特異性吸附小的大孔介質(zhì)聚甲基丙烯酸酯為載體利用Fmoc多肽固相合成法合成了對胰島素有特異性吸附的肽配基親和吸附介質(zhì)，并研究了介質(zhì)對目標(biāo)蛋白的親和吸附特性。 首先在對由噬菌體肽庫中篩選出的對胰島素有特異性結(jié)合的七肽配基(HWWWPAS)的合成中發(fā)現(xiàn)，多肽序列中脯氨酸的存在會使其在二肽水平上發(fā)生分子內(nèi)氨解，產(chǎn)生二酮哌嗪(DKP)，造成大量殘缺序列片段的出現(xiàn)。此外，若肽段羧基端氨基酸的側(cè)鏈基團(tuán)較小也會影響合成效果。

2、當(dāng)去掉七肽序列中的脯氨酸，并以谷氨酸替代靠近羧基端的丙氨酸后，成功地合成了六肽片段(HWWWES)。將其固定化于瓊脂糖上進(jìn)行親和吸附實驗的結(jié)果表明，改造后的六肽配基與七肽配基對目標(biāo)蛋白具有相似的親和特性。 采用光激發(fā)懸浮聚合法成功合成了聚甲基丙烯酸酯(PGE)；用氨水對其進(jìn)行氨基修飾后，以此為載體利用Fmoc多肽固相合成法直接合成了用于親和分離的六肽配基親和介質(zhì)(PGE-hexapeptide)；將合成的介質(zhì)填充成柱，對胰島素、

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