殼聚糖修飾的載藥納米制劑在眼表給藥的應用研究.pdf

1、實驗目的:
　　設計基于單甲氧基聚乙二醇(MPEG)、聚己內(nèi)酯(PCL)和殼聚糖(CS)的雙親性三嵌段共聚物(MPEG-PCL-CS)，并將其作為新型眼部藥物運輸體系，用以包載疏水性非甾體類藥物雙氯芬酸，從而提高藥物的水溶性和穿透角膜屏障的能力。通過陽離子殼聚糖的靜電相互作用，提高載藥納米制劑在眼表的滯留時間，從而達到提高藥物眼部生物利用度，減少給藥頻率和增加患者依從性的目的。
　　實驗方法:
　　首先用單甲氧基聚乙二

2、醇(MPEG)和己內(nèi)酯(ε-CL)以開環(huán)聚合法[1]合成雙親性單甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(MPEG-PCL)嵌段共聚物，在四氫呋喃溶液中，加入丁二酸酐及4-二甲氨基吡啶合成MPEG-PCL-COOH，在二甲基亞砜(DMSO)溶液中，以二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)及N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)作為縮合劑，室溫條件下得到MPEG-PCL-CS三嵌段共聚物。采用1H-核磁共振(1H-NMR)驗證聚合物的合成，通過熒光光譜學法測定其臨界膠束濃度。

3、
　　以雙氯芬酸作為疏水性藥物模型，采用共沉淀法[1]制備DIC/MPEG-PCL-CS納米制劑，并評價納米制劑的粘度和滲透壓，考察其載藥量、包封率和穩(wěn)定性。采用傅里葉變換紅外光譜(FTIR)、X射線衍射光譜分析(XRD)、差示掃描量熱法(DSC)評價其理化特性，透射電鏡（TEM）觀察表面形態(tài)，動態(tài)光散射(DLS)測定其粒徑大小和Zeta電位;用MTT法考察MPEG-PCL-CS共聚物對三種細胞的細胞毒性，德雷茲眼刺激試驗(Dra

4、ize test)評價DIC/MPEG-PCL-CS納米制劑對兔眼的刺激性;體外釋放實驗考察藥物的釋放行為，以離體和在體角膜分別考察DIC/MPEG-PCL-CS納米制劑的體內(nèi)外角膜屏障穿透能力，并在兔眼內(nèi)考察其藥代動力學特征。
　　實驗結(jié)果:
　　我們首先合成了MPEG-PCL-CS雙親性三嵌段共聚物，1 H-NMR分析表明聚合物合成成功，采用共沉淀法成功制備了平均粒徑約為105nm、Zeta電位約為+8mV的DIC/MP

5、EG-PCL-CS納米制劑，F(xiàn)TIR分析表明制備DIC/MPEG-PCL-CS納米制劑的過程中沒有發(fā)生其他新的化學反應;XRD與DSC結(jié)果分析表明納米制劑中雙氯芬酸結(jié)晶度下降，提示其溶解度提高;體外細胞毒性實驗結(jié)果表明MPEG-PCL-CS嵌段共聚物對三種細胞無明顯毒性，眼刺激實驗結(jié)果表明該雙氯芬酸納米制劑對眼表組織無明顯刺激作用，體外釋放實驗證實雙氯芬酸可以緩慢的從納米載體中釋放出來，8小時累積釋放量約為73％，體內(nèi)外角膜穿透實驗顯示