殼聚糖修飾PLGA納米球作為玻璃體腔給藥載體的探索性研究.pdf

1、眼底疾病是極具視覺損傷和致盲風(fēng)險的眼部病變。臨床上藥物治療眼底疾病的主要方式包括：系統(tǒng)給藥、局部眼外給藥和玻璃體腔注射等。然而由于角膜屏障和血—視網(wǎng)膜屏障的存在，系統(tǒng)給予大劑量藥物達到藥效的同時為機體帶來了較大的毒副作用；局部眼外給藥時藥物很難到達眼后節(jié)；玻璃體腔注射具有操作簡便，眼內(nèi)藥物濃度高，相對安全性高等特點，成為目前較為廣泛應(yīng)用的給藥方法。但這種方法存在一定缺陷：首先，給藥后眼內(nèi)藥物半衰期較短，代謝速度快，多次給藥增加眼內(nèi)并發(fā)癥

2、發(fā)生的幾率；其次藥物對病變部分的特異性差，發(fā)揮藥效的同時對眼內(nèi)正常組織造成非特異性損傷；更重要的是，不同類型的眼底疾病其病變累及視網(wǎng)膜不同亞層，如視網(wǎng)膜靜脈阻塞、糖尿病視網(wǎng)膜病變等主要是視網(wǎng)膜內(nèi)層受累；老年性黃斑病變，其病變在脈絡(luò)膜層，患者主要是視網(wǎng)膜外層受累等。然而經(jīng)玻璃體腔注射給藥后，藥物隨機分布在視網(wǎng)膜各亞層，減低了藥效。因此，本論文的目的在于構(gòu)建出操作簡便、高效、緩釋時間長、損傷小的理想型給藥系統(tǒng)。
　　聚乳酸-羥基乙酸共

3、聚物(poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA)和殼聚糖(Chitoson,CS)以良好的生物相容性和降解性在臨床眼科給藥中廣泛的應(yīng)用[1,2]，以PLGA為原料制備出具有強緩釋作用，表面帶負(fù)電并裝載地塞米松磷酸鈉(Dexamethasone Sodium Phosphate,DEX)的納米球，利用殼聚糖衍生物-季銨化殼聚糖（HTCC）和羧化殼聚糖(CMC)對其表面電荷進行修飾。在眼內(nèi)微電場作用下，此創(chuàng)新性給

4、藥體系經(jīng)玻璃體腔注射后能夠靶向、粘附于視網(wǎng)膜表面，解決生物利用度低，毒副作用大等問題，并能夠進一步實現(xiàn)對視網(wǎng)膜各亞層病變部位的多級靶向作用。論文主要內(nèi)容如下：
　　1.不同電荷載藥納米球給藥系統(tǒng)的構(gòu)建和評價。
　　首先，采用改良的乳化/溶劑蒸發(fā)法制備出表面帶負(fù)電的DEX-PLGA載藥納米球,快速膜乳化技術(shù)保證了納米球粒徑均一，實現(xiàn)了批次間的可重復(fù)性。其次，利用殼聚糖陽離子衍生物季銨化殼聚糖HTCC對DEX-PLGA納米球的表

5、面電荷修飾，分別得到表面帶較大正電荷（電位36.4mV、粒徑388.6nm）的DEX-PLGA：HACC（++）、較小正電荷（電位16.5mV、粒徑355.7nm）的DEX-PLGA：HACC（+）和中性電荷（電位-0.22mV、粒徑361.5nm）的DEX-PLGA：HACC（0）；用帶負(fù)電的羧化殼聚糖CMC修飾DEX-PLGA：HACC表面，使其成為表面帶不同程度負(fù)電荷（電位-32.6mV、粒徑359.2nm和電位-16.6mV、粒

6、徑341.8nm）的DEX-PLGA：HACC：CMC（--）和DEX-PLGA：HACC：CMC（-），并對納米球表面樣貌，粒徑大小，表面電荷和藥物釋放行為進行測定。最后，模擬納米球給藥系統(tǒng)在微電場中的運動情況，結(jié)果表明納米球的運動速度與其表面所帶電荷呈正相關(guān)，電性不同運動方向不同。
　　2、細(xì)胞水平上考察不同電荷納米球細(xì)胞毒性作用、在微電場（100mV）作用下對細(xì)胞單層通透性作用。本論文通過猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜細(xì)胞RF/6A考察納

7、米球的毒性作用，結(jié)果表明濃度在250μg/ml以內(nèi)，納米球表現(xiàn)出較好的安全性。在微電場作用下，帶正電荷的納米球?qū)?xì)胞的通透性得到較大的提高。
　　3、在動物水平上考察了在微電場作用下納米球?qū)﹄x體豬視網(wǎng)膜穿透作用；評價了給藥后納米球在活體眼內(nèi)的分布、滯留情況；對視網(wǎng)膜的通透能力以及對脈絡(luò)膜新生血管（Choroidal neovascularization,CNV）模型給藥后進行藥效評價。在微電場作用下納米球?qū)σ暰W(wǎng)膜的穿透作用與其表面