真菌毒素多殘留膠體金免疫層析試紙條的研制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以真菌毒素伏馬毒素B1(FB1)、黃曲霉毒素B1(AFB1)為研究對象,研制出檢測伏馬毒素B1、黃曲霉毒素B1的單殘留膠體金免疫層析試紙條以及同時檢測兩種真菌毒素的多殘留膠體金免疫層析試紙條。
  通過優(yōu)化,確定伏馬毒素B1膠體金免疫層析試紙條的最佳工作條件為:膠體金粒徑為18nm;硝酸纖維素膜選擇(NC膜)Millipore HF135s;膠體金標(biāo)記抗體蛋白最適pH值為7.5,最佳抗體量為30μg/mL;包被原的最佳包被量

2、為0.07μg/條,金標(biāo)抗體稀釋倍數(shù)為1∶5;羊抗兔二抗稀釋倍數(shù)為1∶150;包被稀釋液為磷酸鹽緩沖溶液(PB);金標(biāo)墊處理液為PBS緩沖溶液。伏馬毒素B1膠體金免疫層析試紙條視覺檢測限為5ng/mL,檢測時間小于10 min。方法與其他真菌毒素均沒有交叉反應(yīng),方法具有很好的特異性。谷物樣品的檢測限為100ng/g。
  通過優(yōu)化,確定黃曲霉毒素B1膠體金免疫層析試紙條的最佳工作條件為:膠體金粒徑為18 nm;硝酸纖維素膜選擇Mi

3、llipore HF135s;膠體金標(biāo)記抗體蛋白最適pH值為8.0,最佳抗體量為20μg/mL;包被原的最佳包被量為0.07μg/條,金標(biāo)抗體稀釋倍數(shù)為1∶5;羊抗兔二抗稀釋倍數(shù)為1∶130;包被稀釋液為PBS緩沖溶液;金標(biāo)墊處理液為PBS緩沖溶液。黃曲霉毒素B2膠體金免疫層析試紙條視覺檢測限為0.5 ng/mL。檢測時間小于10 min。方法與其他真菌毒素均沒有交叉反應(yīng),方法具有很好的特異性。谷物樣品的檢測限為5 ng/g。
 

4、 通過對伏馬毒素B1、黃曲霉毒素B1的多殘留膠體金免疫層析試紙條同時檢測兩種毒素的工作條件的優(yōu)化,確定最佳工作條件為:伏馬毒素金標(biāo)抗體和黃曲霉毒素金標(biāo)抗體混合比例為2∶1; NC膜劃線順序為質(zhì)控線、FB1檢測線、AFT檢測線;樣品墊處理液為0.25% Tween-20水溶液,其他工作條件同單殘留檢測試紙條工作條件。伏馬毒素B1、黃曲霉毒素B1的多殘留膠體金免疫層析試紙條視覺檢測限分別為5 ng/mL、0.5 ng/mL。檢測時間小于10

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