大鼠創(chuàng)傷性腦損傷后MKP-1對(duì)精氨酸代謝途徑的調(diào)節(jié)機(jī)制.pdf

1、目的:研究創(chuàng)傷性腦損傷（Traumatic Brain Injury，TBI）后大鼠腦組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，損傷周圍腦皮質(zhì)內(nèi)尿素和內(nèi)皮性一氧化氮含量變化，MKP-1、精氨酸酶Ⅰ、內(nèi)皮性一氧化氮合酶表達(dá)部位及表達(dá)量的改變，以及MAPK信號(hào)分子的相應(yīng)變化，探討MKP-1對(duì)精氨酸代謝途徑的調(diào)節(jié)作用及分子機(jī)制。
　　方法:采用自由落體法制作大鼠創(chuàng)傷性腦損傷模型，HE染色觀察損傷程度，酶化學(xué)法檢測(cè)損傷周圍腦組織中尿素和一氧化氮含量的變化，免疫

2、組織化學(xué)技術(shù)觀察腦組織MKP-1、精氨酸酶Ⅰ表達(dá)部位的差異，免疫印跡檢測(cè)腦組織MKP-1、eNOS、精氨酸酶Ⅰ以及MAPKs信號(hào)分子表達(dá)水平的改變。
　　結(jié)果:大鼠創(chuàng)傷性腦損傷后，損傷周圍腦組織疏松、部分神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞腫脹。損傷周圍腦組織中尿素水平隨損傷時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，顯著上調(diào)至24h達(dá)到峰值后下降，72h較對(duì)照組仍有顯著差異;腦損傷后一氧化氮含量顯著減少，3h達(dá)到波谷后輕微上調(diào)，至72h仍明顯低于對(duì)照組。免疫組化結(jié)果顯示，M

3、KP-1廣泛表達(dá)于大腦皮質(zhì)、海馬和下丘腦中神經(jīng)元，損傷周圍腦組織中MKP-1免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量增加，染色在3h和6h明顯增強(qiáng)，部分血管周圍可見(jiàn)染色較強(qiáng)的免疫陽(yáng)性細(xì)胞;精氨酸酶Ⅰ廣泛表達(dá)于大腦皮質(zhì)和下丘腦神經(jīng)元的胞漿，神經(jīng)元免疫染色隨損傷時(shí)間的延長(zhǎng)而略有下降，而大量血管周圍可見(jiàn)免疫陽(yáng)性細(xì)胞分布。免疫印跡結(jié)果顯示，MKP-1表達(dá)水平在腦損傷后3h上調(diào)，6h達(dá)到峰值，隨后降低至24h達(dá)到正常水平;eNOS表達(dá)水平在腦損傷后3h開(kāi)始顯著降低，至6

4、h達(dá)到波谷后上升至24h恢復(fù)正常水平;精氨酸酶Ⅰ水平損傷后3h至24h并無(wú)顯著改變，但72h下降明顯。pERK和p-p38 MAPK表達(dá)水平明顯降低，磷酸化pJNK水平無(wú)明顯改變。
　　結(jié)論:大鼠創(chuàng)傷性腦損傷后病理因素誘導(dǎo)MKP-1表達(dá)上調(diào)，其通過(guò)特異性下調(diào)pERK和p-p38 MAPK水平調(diào)節(jié)精氨酸代謝途徑，抑制eNOS而促進(jìn)精氨酸酶Ⅰ的表達(dá)，導(dǎo)致NO產(chǎn)量減少及尿素增加，進(jìn)而造成大腦血灌注量不足和腦水腫的形成。MKP-1可能成為