MAPK負(fù)調(diào)控因子MKP-1在APP-PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)的分布及表達(dá).pdf

1、目的：研究絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（Mitogen-activated protein kinase phosphatase-1, MKP-1）在不同月齡段APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默?。ˋlzheimer's Disease, AD）模型小鼠及其同窩野生型小鼠腦內(nèi)的分布及表達(dá)差異，以探討MKP-1在AD病理發(fā)生發(fā)展過程中所起的作用。
　　方法：選擇3月、8月和12月齡的APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠及其同月齡段的野生型小鼠作

2、對(duì)比，運(yùn)用免疫組化觀察AD模型小鼠及其同窩野生型小鼠腦內(nèi)MKP-1的分布及表達(dá)；免疫熒光檢測(cè)MKP-1在不同年齡段AD模型小鼠腦內(nèi)的變化；Western Blot檢測(cè)MKP-1、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)、p-ERK、c-Jun氨基端激酶（c-JUN N-te

3、rminal kinases,JNK）、p-JNK、P38激酶同工酶（P38 kinases,p38）及p-p38的變化；Real Time-PCR檢測(cè)MKP-1和BDNF的mRNA的變化，激光共聚焦檢測(cè)MKP-1和4G8、p-ERK和4G8、p-JNK和4G8、p-p38和4G8共表達(dá)情況。
　　結(jié)果：1.形態(tài)學(xué)結(jié)果：1）MKP-1在APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)廣泛分布，包括大腦皮質(zhì)、海馬、紋狀體、嗅球和小腦等；MKP-1免疫

4、陽(yáng)性細(xì)胞在APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)的數(shù)量明顯低于同月齡的正常對(duì)照組（P<0.05），且隨著APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠月齡的增加，MKP-1免疫陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量逐漸降低；實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，MKP-1免疫陽(yáng)性物形成類似老年斑的斑塊；免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果顯示，與4G8陽(yáng)性斑塊（此即老年斑）相比，MKP-1陽(yáng)性斑塊的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于4G8陽(yáng)性斑塊的數(shù)量，但是MKP-1只能表達(dá)出部分老年斑，隨著APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠月齡的增加，表達(dá)的老年斑數(shù)目也逐漸增

5、加。
　　2.Western blot結(jié)果：隨著APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠月齡的增加， MKP-1（P<0.05）和BDNF（P<0.05）的蛋白表達(dá)明顯減弱，JNK（P>0.05）、ERK（P>0.05）和P38（P>0.05）的變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異而p-JNK（P<0.05）、p-ERK（P<0.05）和p-P38（P<0.05）則蛋白表達(dá)明顯上調(diào)。
　　結(jié)論：MKP-1在APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因不同年齡段小鼠腦內(nèi)及與其同窩野