幽門螺桿菌克拉霉素耐藥菌株鑒定及23S rRNA全基因生物信息學研究.pdf

1、目的：分離培養(yǎng)胃粘膜幽門螺旋桿菌，鑒定并進行克拉霉素耐藥性分析；分析克拉霉素耐藥菌株與敏感菌株之間23S rRNA基因的DNA序列差異，進行生物信息學研究，探索23S rRNA基因突變在幽門螺旋桿菌克拉霉素耐藥產(chǎn)生過程中的作用。 方法：將胃鏡活檢粘膜標本，接種于含7％-10％羊血H．pylori選擇性培養(yǎng)基，37℃微需氧環(huán)境培養(yǎng)3-5天，分離H．pylori菌株，采用傳統(tǒng)方法和UreA基因PCR擴增鑒定。克拉霉素藥敏試驗采用E-

2、test法，篩選出耐藥菌株和敏感菌株。提取H．pylori菌株基因組DNA，PCR擴增23S rRNA全基因，測序并采用Vector MTT Suite 9.0進行比對分析，MFold預測野生型和變異型23S rRNA的二級結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：220例胃粘膜標本日．pylori培養(yǎng)陽性率為30.4 5％(67/220)；胃炎培養(yǎng)陽性率為20.15％(27/134)；消化性潰瘍培養(yǎng)陽性率為48.72％(38/78)；胃癌培養(yǎng)陽性率為25

3、.00％(2/8)；消化性潰瘍組H.pylori培養(yǎng)陽性率明顯高于胃炎組和胃癌組。67例H.pylori菌株克拉霉素耐藥23株，占34.33％(23/67)；敏感株44株，占65.67％(44/67)；未發(fā)現(xiàn)克拉霉素中介株。胃炎組、消化性潰瘍組和胃癌組克拉霉素耐藥率分別為29.63％(8/27)、36.84％(14/38)和50.00％(1/2)。16株克拉霉素耐藥H.pylori菌株2143位點A>G突變5株，突變率為31.25％；2