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1、本文三部分對巖豆凝集素的化學(xué)修飾與光譜進(jìn)行分析,對風(fēng)雨花甘露糖結(jié)合凝集素基因的生物信息學(xué)及其在大腸桿菌中的表達(dá)與純化進(jìn)行了研究。 一、巖豆凝集素(MDL)寡糖鏈及部分氨基酸殘基的基團(tuán)特異性化學(xué)修飾。糖鏈氧化、組氨酸和精氨酸殘基的修飾對凝血活性無影響;羧基修飾使MDL喪失80%凝血活性,當(dāng)修飾過程中存在甘露糖時(shí),凝血活性保持完整,表明天冬氨酸或谷氨酸的羧基參與凝集素的糖結(jié)合位點(diǎn)的組成。熒光光譜研究表明色氨酸位于相對疏水區(qū);結(jié)合甘
2、露糖的巖豆凝集素能淬滅色氨酸的熒光,但最大激發(fā)波長位置不變。 二、風(fēng)雨花凝集素(簡稱ZGA)是從風(fēng)雨花(Zephyranthesgrandiflora)地下球莖中提取的一種甘露糖凝集素。目前,對這種新的單子葉石蒜科風(fēng)雨花甘露糖結(jié)合凝集素基因和蛋白的結(jié)構(gòu)、功能等還不完全清楚,這勢必限制了風(fēng)雨花凝集素的研究進(jìn)程。所以,我們的目標(biāo)是利用生物信息學(xué)知識和工具對風(fēng)雨花凝集素基因和蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析,以建立一種比較理想的生物信息學(xué)分析程序
3、,為試圖闡述風(fēng)雨花凝集素的結(jié)構(gòu)和功能提供理論基礎(chǔ)。 三、風(fēng)雨花凝集素(ZGA)是從石蒜科植物風(fēng)雨花(Zephyranthesgrandiflora)的地下球莖中提取的一種甘露糖結(jié)合凝集素。風(fēng)雨花凝集素具有較高的研究意義和開發(fā)價(jià)值。鑒于目前用于性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和功能的單子葉植物甘露糖結(jié)合凝集素主要是通過天然植物組織的分離純化,但其較低的含量或材料的限制阻礙了研究進(jìn)程。所以,我們的目標(biāo)是利用基因工程手段構(gòu)建風(fēng)雨花凝集素三個(gè)基因片段的重組
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