綠豆凝集素的純化及性質(zhì)研究.pdf

1、本文主要對綠豆凝集素的純化和綠豆凝集素的性質(zhì)進行了初步的研究。 綠豆凝集素的純化采用硫酸銨沉淀，羧甲基纖維素陽離子交換層析和丙烯葡聚糖凝膠過濾層析。0～50％硫酸銨飽和度下沉淀得到的綠豆凝集素總凝集活力占硫酸銨沉淀得出的凝集素總活力的96％。在所試驗的保護劑中，只有β-巰基乙醇對綠豆凝集素的保護作用最明顯，但與D-半乳糖和蔗糖混合使用時，則沒有顯著效果。聚乙烯吡咯烷酮對凝集素的活力具有促進作用。蔗糖和D-半乳糖對綠豆凝集素沒有顯

2、著的保護作用。 綠豆凝集素樣品經(jīng)硫酸銨沉淀后，用羧甲基纖維素陽離子交換層析柱進行了進一步的純化，樣品比活力相對硫酸銨沉淀得到的樣品提高了89.3倍。硫酸銨沉淀的樣品用丙烯葡聚糖凝膠過濾層析柱進行純化，比活力僅提高了17.8倍。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳后出現(xiàn)了4個蛋白譜帶，分子量為150104 Da。 綠豆凝集素血凝集活力最適pH在pH 7.0～7.5之間。而且綠豆凝集素對熱處理有較大的抵抗能力，在100℃下保持活力長達

3、8 min。Ca<'2+>和Ba<'2+>等二價金屬離子在30～40 mM濃度下對綠豆凝集素凝集活力的促進作用最強，Mn<'2+>在80～90 mM濃度下對綠豆凝集素活力的促進作用最強。相比之下，三價金屬離子Al<'3+>在10 mM濃度下，對綠豆凝集素有抑制作用。 糖抑制實驗顯示，a-半乳糖，D-果糖和葡萄糖對綠豆凝集素顯示出了抑制效應(yīng)。在所檢測的糖類中，a-半乳糖的抑制作用最明顯。 綠豆凝集素對葡枝根霉，大腸桿菌和毛