微小RNA-124在急性創(chuàng)傷性脊髓損傷診治中的應(yīng)用研究.pdf

1、背景：
　　脊髓損傷（英文全稱為spinalcordinjury，一般簡寫作SCI）是一類由各種致病因素導(dǎo)致脊髓組織受損，主要以軀體損傷平面以的下感覺、運動有限或全部功能障礙等為其臨床表現(xiàn)，并且多伴隨大小便失禁。它屬于中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的范疇。構(gòu)成脊髓損傷的原因多種多樣：臨床上主要有相關(guān)病毒的感染，侵及脊髓的膿毒癥，脊髓組織的良惡性占位性病變，機體其他的系統(tǒng)性病變導(dǎo)致的脊髓組織缺血缺氧或內(nèi)環(huán)境紊亂等。但是臨床上最多見的還是由于各種外

2、力所導(dǎo)致的脊髓組織急性損傷。從解剖學(xué)上講，脊髓組織位于堅固的骨性脊柱組織和堅韌且緊密聯(lián)結(jié)的結(jié)締組織層層包繞之中，而且處于軀干的中軸部位，平素難以受到外力的直接作用。唯有較高能量的外界暴力，通過破壞脊髓組織周圍的骨性結(jié)構(gòu)或者堅韌的韌帶組織，才可能對脊髓組織本身造成有效的打擊。近年來，隨著交通運輸事業(yè)的高速發(fā)展，以及以房地產(chǎn)業(yè)為首的建筑行業(yè)的長足進步，再加上安全駕駛、安全生產(chǎn)等安全意識淡薄，這些經(jīng)濟社會的深刻變化為急性創(chuàng)傷性脊髓損傷患者的增

3、長提供了溫床。過去一般認為無論何種原因造成的脊髓損傷，其過程都是不可逆的，也就是說脊髓組織很難恢復(fù)到損傷前的狀態(tài)，這就造成了脊髓損傷患者極為痛苦的預(yù)后。其兼具直接的致殘性和間接的致死性，缺乏最基礎(chǔ)的生活質(zhì)量，而且要極大的拖累患者的家庭，造成家庭成員生活質(zhì)量的同步下降，相對于其他的創(chuàng)傷，將成倍的消耗社會資源。誠然，經(jīng)過了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)一百余年的發(fā)展，針對脊髓損傷，尤其是創(chuàng)傷性脊髓損傷已經(jīng)出現(xiàn)了各種各樣的診療技術(shù)，但是其干預(yù)手段總是滯后的，在臨床

4、實踐中，對于脊髓損傷的診斷，除主觀性較強的體格檢查外，要極端的依賴影像學(xué)，尤其是磁共振，神經(jīng)電生理等的應(yīng)用，人類第一次可以在術(shù)前了解到患者脊髓組織的損傷情況。古人云：尺有所短，寸有所長，磁共振及神經(jīng)電生理檢查本身具有很大的局限性，費時長，費用高，需要患者有較高的配合性，在中心性醫(yī)院才能開展此項檢查，大多機構(gòu)并非24小時應(yīng)診，不能有效客觀的識別脊髓組織的損傷程度，僅能進行范圍性的概覽等等。而現(xiàn)代比較成熟的治療手段要求我們要進行早期的內(nèi)外科

5、干預(yù)。這就要求我們有一種獲取便捷而準確的實驗室客觀指標，用于急性創(chuàng)傷性脊髓損傷的鑒別。
　　脊髓組織的再生研究一直是創(chuàng)傷外科研究的前沿。在脊髓再生的研究中，對于脊髓損傷及修復(fù)的分子機制研究較多，尤其是對于脊髓的二次損傷，相關(guān)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑的研究如火如荼。微小RNA(英文全稱為Micro-ribonucleic-acid，一般簡稱為MicroRNA或miRNA)是一類大約由21－25個核苷酸組成的內(nèi)源性表達的單鏈非編碼小RNA，它通過抑制

6、靶信使RNA（英文全稱為Messenger-ribonucleic-acid，一般簡稱為mRNA）翻譯或促使其降解的方式對基因表達起調(diào)控作用。眾多的相關(guān)分子中，microRNA-124在中樞神經(jīng)組織中表達的特異性，大量的動物實驗指向其作為闡釋脊髓損傷及其修復(fù)過程的關(guān)鍵一環(huán)。
　　目的：
　　本研究旨在通過收集急性創(chuàng)傷性脊髓損傷患者的相關(guān)臨床數(shù)據(jù)及外周血中的相關(guān)分子檢測，探討微小RNA-124在急性創(chuàng)傷性脊髓損傷診治中的應(yīng)用。

7、
　　方法：
　　選擇2014年9月至2015年9月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診入院且資料完整的急性脊柱骨折的患者45例，按照脊髓損傷神經(jīng)學(xué)分類國際標準中的美國脊髓損傷協(xié)會殘損分級（AIS分級）將患者分為脊髓完全性損傷組（AIS分級A級）15例，脊髓不完全性損傷組（AIS分級B、C、D級）15例，神經(jīng)功能正常組（AIS分級E級）15例，另選取同期入院的急性四肢骨折患者15例為對照組。抽取各組患者傷后24小時外周血并對其血漿mi

8、RNA-124水平及血清TNF-ɑ水平進行測定。統(tǒng)計學(xué)采用SPSS21.0軟件分析數(shù)據(jù)，連續(xù)性變量均進行正態(tài)性檢驗。符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標準差（(-x)±s）表示，定性資料的多組間比較采用χ2檢驗；定量資料的多組間比較采用單因素方差分析。按照有無神經(jīng)損傷重新分組（完全損傷組+不完全損傷組vs神經(jīng)功能正常組+四肢骨折組），對外周血miR-124及TNF-ɑ兩指標繪制受試者工作特征曲線（ROC），并計算曲線下面積（AUC）；以P<

9、0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、臨床資料
　　各組患者除入院體溫外，在年齡、性別、身高、體重等方面差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P>0.05)。
　　2、各組外周血miR-124的表達水平
　　完全損傷組、不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組、四肢骨折組患者外周血miR-124表達水平分別為（0.48±0.06）、（0.47±0.07）、（0.39±0.07）、（0.34±0.04），各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（

10、F=27.28，P<0.01）。在多重比較中，完全損傷組與不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組與四肢骨折組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P>0.05）。完全損傷組、不完全損傷組的miR-124表達水平均高于其余兩組（均P<0.05）。
　　3、各組外周血TNF-ɑ的表達水平
　　完全損傷組、不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組、四肢骨折組患者外周血TNF-ɑ表達水平分別為（1.97±0.22）ng?ml-1、（1.85±0.43）ng?ml-1、（

11、1.78±0.21）ng?ml-1、（1.69±0.19）ng?ml-1。各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=3.51，P<0.05）。在多重比較中，完全損傷組與不完全損傷組、神經(jīng)功能正常組與四肢骨折組差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P>0.05）。完全損傷組、不完全損傷組的TNF-ɑ表達水平均高于其余兩組（均P<0.05）。
　　4、外周血miR-124與TNF-ɑ水平的ROC曲線分析
　　外周血miR-124與TNF-ɑ水平診斷脊髓損傷的

12、ROC曲線下面積分別為0．894（95％CI：0.828-0.961，P<0.01）及0.758（95%CI：0.651-0.865，P<0.01）。說明外周血miR-124與TNF-ɑ水平均可指導(dǎo)診斷脊髓損傷，且miR-124較TNF-ɑ具有更大的臨床指導(dǎo)價值。
　　結(jié)論：
　　本研究表明，miRNA-124在急性脊髓損傷患者的外周血中特異性高表達，對早期診斷急性脊髓損傷有一定的應(yīng)用價值。
　　我們希望收集更多基層的