哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒的變化及臨床意義研究.pdf

1、目的:
　　支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱(chēng)哮喘）是呼吸系統(tǒng)常見(jiàn)病、多發(fā)病。近年來(lái)發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢(shì)。它是由多種細(xì)胞和細(xì)胞組分參與的氣道慢性變態(tài)反應(yīng)性炎癥，發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚，但免疫-炎癥機(jī)制被認(rèn)為是其發(fā)病的重要機(jī)制，而嗜酸性粒細(xì)胞作為主要的免疫效應(yīng)細(xì)胞參與整個(gè)炎癥反應(yīng)過(guò)程。
　　微粒是細(xì)胞活化、損傷或凋亡后從細(xì)胞膜脫落的直徑100nm至2μm的小囊泡顆粒，具有細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)、促炎、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等生物學(xué)活性，可通過(guò)與靶細(xì)胞的

2、相互作用，啟動(dòng)靶細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)，與疾病的發(fā)生、發(fā)展息息相關(guān)。現(xiàn)已證實(shí)它與自身免疫性疾?。ㄈ缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡）關(guān)系密切。在子癇、糖尿病、膿毒血癥、腫瘤、心血管疾病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)微粒水平明顯升高，并與疾病的嚴(yán)重程度、分期及預(yù)后相關(guān)。因此，通過(guò)對(duì)微粒的檢測(cè)、分析，可能優(yōu)化疾病的診斷與治療。
　　我們課題組前期發(fā)現(xiàn)在COPD患者BALF中淋巴細(xì)胞微粒是增高的，并證實(shí)T淋巴細(xì)胞來(lái)源的微粒通過(guò)AKT/FOX01通路阻滯氣道上皮細(xì)胞于G1期，抑制氣

3、道上皮生長(zhǎng)，活化p38-MAPK通路，介導(dǎo)上皮細(xì)胞凋亡。最新研究表明，呼吸道感染可以觸發(fā)微粒的釋放，通過(guò)ATP活化，微粒依賴(lài)P2X7/caspase-1通路釋放IL-1β、IL-18，參與氣道內(nèi)中性粒細(xì)胞聚集、巨噬細(xì)胞活化和慢性炎癥反應(yīng)的維持，而感染常引起哮喘急性發(fā)作，使氣道炎癥、呼吸道癥狀加重，肺功能下降。由此可見(jiàn)，微粒參與了氣道慢性炎癥過(guò)程，并起著促炎癥反應(yīng)作用。
　　在哮喘的慢性氣道炎癥中，嗜酸性粒細(xì)胞作為主要的效應(yīng)細(xì)胞在其

4、活化或凋亡過(guò)程中必然會(huì)產(chǎn)生微粒，然而迄今為止有關(guān)嗜酸性粒細(xì)胞微粒的變化和作用國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究擬檢測(cè)哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目的變化，并初步探討該變化與疾病嚴(yán)重程度以及治療療效之間的可能關(guān)系，以期為哮喘診治提供新的思路。
　　方法:
　　按照入組標(biāo)準(zhǔn)納入研究對(duì)象共65例，其中哮喘組32例，健康對(duì)照組33例。采集外周靜脈血，將所采集的樣本進(jìn)行離心處理后，用相應(yīng)抗體標(biāo)記，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)每100μL外周血

5、上清液中嗜酸性粒細(xì)胞微粒的水平。哮喘組還需完成ACT量表、肺功能(FEV1、FEV1％)、FeNO測(cè)定、血常規(guī)(Eos count)、皮膚過(guò)敏原點(diǎn)刺試驗(yàn)等檢查，在正規(guī)抗哮喘治療（以吸入型糖皮質(zhì)激素+長(zhǎng)效β2受體激動(dòng)劑為主）3個(gè)月后再次抽取相同體積的靜脈血，檢測(cè)循環(huán)血嗜酸性粒細(xì)胞微粒水平，復(fù)查上述指標(biāo)，計(jì)算各指標(biāo)前后變化率(△)=（治療前值-治療后值）/治療前值×100％，并將微粒變化與各指標(biāo)變化情況作相關(guān)性分析。分別按照過(guò)敏情況、哮喘控

6、制水平將哮喘組分為過(guò)敏組、非過(guò)敏組和良好控制組、未控制組，并比較各組微粒水平。
　　結(jié)果:
　　1.哮喘組與對(duì)照組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目比較
　　1.1檢測(cè)發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞微粒在哮喘組治療前、治療后及對(duì)照組的數(shù)目分別為:(136.81±150.08)/100μl、(50.65±33.09)/100μl、(36.78±19.99)/100μl。
　　1.2哮喘組治療前循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義（Z=-4.069，P＜0.01）。
　　1.3哮喘組治療后循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.052，P=0.044)。
　　1.4經(jīng)治療哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目明顯下降，即哮喘組治療前高于治療后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-4.526，P＜0.01）。
　　2.哮喘亞組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目比較
　　2.1檢測(cè)發(fā)現(xiàn)治療前良好控制組、未控制組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目分別為:

8、(119.05±112.41)/100μl、(156.93±186.06)1100μl，治療后分別為:(39.76±20.83)1100μl、(63.00±40.29)/100μl，經(jīng)比較治療前兩亞組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目無(wú)明顯差異（Z=-0.227，P=0.821），治療后哮喘良好控制組微粒數(shù)目低于未控制組（t=-2.086，P=0.046）。
　　2.2檢測(cè)發(fā)現(xiàn)治療前過(guò)敏組、非過(guò)敏組嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目分別為:(149.64±1

9、54.10)/100μl、(126.83±150.58)/100μl，治療后分別為:(50.50±31.30)/100μl、(49.77±35.16)/100μl，經(jīng)比較兩亞組治療前、后微粒數(shù)目均無(wú)明顯差異(t=0.421，P=0.677;t=0.006，P=0.952)。
　　2.3過(guò)敏組哮喘良好控制率[9(64.3％)]略高于非過(guò)敏組[8(44.4％)]，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=1.245，P=0.265）。
　　

10、3.嗜酸性粒細(xì)胞微粒變化與其他臨床指標(biāo)變化的相關(guān)性
　　3.1哮喘患者治療后肺功能指標(biāo)FEV1、FEV1％改善(P＜0.01)，△微粒與△FEV1、△FEV1％呈負(fù)相關(guān)（r=-0.558，P＜0.01;r=-0.453，P=0.005）。
　　3.2哮喘患者治療后血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)減少(P＜0.01)，△微粒與△Eos count呈正相關(guān)（r=0.625，P＜0.01）。
　　3.3哮喘患者治療后FeNO水平減低(P＜

11、0.01)，△微粒與△FeNO呈正相關(guān)(r=0.313, P=0.041)。
　　3.4哮喘患者治療后ACT評(píng)分增加(P＜0.01)，△微粒與△ACT呈負(fù)相關(guān)(r=-0.399，P=0.012)。
　　結(jié)論:
　　1.哮喘患者循環(huán)血中嗜酸性粒細(xì)胞微粒數(shù)目明顯高于健康對(duì)照組，并與外周血嗜酸性粒細(xì)胞、FeNO等炎癥指標(biāo)變化一致，提示嗜酸性粒細(xì)胞微粒可能參與了哮喘慢性氣道炎癥反應(yīng)的病理生理過(guò)程。
　　2.哮喘患者循環(huán)血