脊髓損傷后不同時(shí)期移植人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 觀察大鼠脊髓損傷后不同時(shí)期局部移植人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(humanumbilical cord mesenchymal stem cells，nUCMSCs)修復(fù)脊髓損傷的效果，探討hUCMSCs局部移植治療脊髓損傷(spianl cord injury SCI)的最佳移植時(shí)機(jī)。
　　 方法：
　　 雌性Wistar大鼠80只，隨機(jī)分為A、B、C、D組，每組20只，以ImpactorModel-Ⅱ打擊

2、器制備脊髓胸10(T10)損傷模型。A組為單純損傷組、B組損傷后3d移植hUCMSCs、C組損傷后1w移植hUCMSCs、D組損傷后3w移植hUCMSCs，分別于造模后24h、移植前1d及移植后8w(A組與D組損傷后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)相同)每周對(duì)各組大鼠后肢功能進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分(BBB評(píng)分)；移植后8w免疫組化染色觀察移植細(xì)胞的存活、分化和血管再生情況，10w時(shí)用生物素葡聚糖胺(biotin dextran amine，BDA)示蹤皮質(zhì)脊髓束(c

3、orticospinal tract，CST)觀察軸突的再生情況。
　　 結(jié)果：
　　 SCI后24h各組間大鼠BBB評(píng)分無(wú)顯著性差異(P>0.05)，損傷后3w移植hUCMSCs組在移植前和移植后1w與單純損傷組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的BBB評(píng)分無(wú)顯著性差異(P>0.05)，移植后2w起各時(shí)間點(diǎn)評(píng)分均明顯高于單純損傷組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；單純損傷組在SCI后9w是到達(dá)平臺(tái)期，與實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意

4、義(P>0.05)。移植各組移植后BBB評(píng)分逐漸上升，后一個(gè)時(shí)間點(diǎn)與同組前一時(shí)間點(diǎn)比較差異有顯著性意義(P<0.05)，移植后6w開(kāi)始損傷后1w移植hUCMSCs組的BBB評(píng)分明顯高于損傷后3d移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組(P<0.05)。免疫組化染色觀察到單純損傷組脊髓中未見(jiàn)Brdu陽(yáng)性細(xì)胞，損傷區(qū)血管形態(tài)欠完整，未見(jiàn)新生血管；
　　損傷周圍星形膠質(zhì)細(xì)胞大量增生，細(xì)胞肥大、突起增多、排列不規(guī)則，形成膠質(zhì)

5、瘢痕；未見(jiàn)BDA標(biāo)記的皮質(zhì)脊髓束通過(guò)損傷區(qū)。損傷后3d移植hUCMSCs組、損傷后1w移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組脊髓中均有Brdu陽(yáng)性標(biāo)記的細(xì)胞存活，損傷后1w移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組中細(xì)胞數(shù)量明顯多于損傷后3d移植hUCMSCs組，但三組中均未見(jiàn)到移植細(xì)胞向神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞分化；損傷后3d移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組損傷周圍的星形膠質(zhì)細(xì)胞較單純損傷組減

6、少，但排列仍欠規(guī)則；損傷后1w移植hUCMSCs組損傷周圍星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)趨于正常，排列規(guī)則，且有大量星形膠質(zhì)細(xì)胞通過(guò)損傷區(qū)，血管再生數(shù)目及通過(guò)損傷區(qū)的皮質(zhì)脊髓束神經(jīng)纖維也明顯對(duì)于損傷后3d移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組。
　　 結(jié)論：
　　 SCI后1w局部移植的hUCMSCs不僅能長(zhǎng)期存活，還能明顯抑制膠質(zhì)瘢痕形成，改善局部微循環(huán)，從而促進(jìn)軸突再生，改善實(shí)驗(yàn)大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能。提示與3d和3w相比