索拉非尼耐藥腎癌細(xì)胞系的建立及索拉非尼治療晚期腎癌耐藥情況的臨床調(diào)查.pdf

1、目的:目前，雖然以索拉非尼為代表的分子靶向化療藥物的面世為腎癌晚期患者的治療帶來(lái)了新的希望，但是有一部分患者進(jìn)行靶向治療初始即對(duì)藥物耐藥，或者即使最初有效的患者在治療一段時(shí)間后也逐漸產(chǎn)生繼發(fā)性耐藥，嚴(yán)重的影響了靶向化療藥物的療效。鑒于此，本課題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)建立耐索拉非尼腎癌細(xì)胞系，以求進(jìn)一步探究其耐藥機(jī)制，指導(dǎo)臨床用藥，延長(zhǎng)患者的生命。并回顧性研究我院索拉非尼治療晚期腎癌患者的臨床資料，分析其耐藥情況的現(xiàn)狀及可能的耐藥原因。
　　方法

2、:實(shí)驗(yàn)研究:建立耐索拉非尼腎癌細(xì)胞系的相關(guān)研究。將人腎透明細(xì)胞癌786-O細(xì)胞系分為A、B兩組，A組只以含10％胎牛血清的1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，B組在含10％胎牛血清的1640培養(yǎng)基中加入索拉非尼0.01μmol/L培養(yǎng)，兩組均置于5％CO2的37℃孵育箱中培養(yǎng)，多次傳代后用MTT法測(cè)得兩組IC50值，按公式計(jì)算耐藥倍數(shù)。耐藥倍數(shù)大于25則耐藥細(xì)胞系建立成功。
　　臨床調(diào)查:回顧分析我院2007年10月-2013年10月95例晚期腎

3、癌進(jìn)行索拉非尼治療的患者，并獲得完整隨訪的臨床及病理資料，95例患者中男性患者74例，女性患者21例，平均年齡61歲（中位數(shù)60歲;范圍為27-85歲），95例患者中86例為透明細(xì)胞癌，1例為嫌色細(xì)胞癌，乳頭狀細(xì)胞癌2例，透明細(xì)胞癌合并嫌色細(xì)胞癌1例，病理類型未明5例。對(duì)全部病例進(jìn)行隨訪，平均生存時(shí)間26個(gè)月（中位數(shù)為20個(gè)月;范圍為3-81個(gè)月）。其中耐藥人數(shù)17人，約占18％，其平均生存時(shí)間約16個(gè)月，非耐藥患者78人，平均生存時(shí)間

4、約28個(gè)月。通過(guò)對(duì)其臨床資料、病理資料以及長(zhǎng)期隨訪資料的分析，分析產(chǎn)生耐藥的原因并利用Kaplan-Meier生存函數(shù)，比較兩組患者總生存期有無(wú)差異。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)研究:用MTT法于波長(zhǎng)490nm處測(cè)得敏感及耐藥兩組OD值，經(jīng)過(guò)計(jì)算得出兩組IC50值分別為敏感組0.009μmol/L，耐藥組0.289μmol/L。代入公式算得耐藥倍數(shù)約為32.11。耐藥倍數(shù)大于25，耐藥細(xì)胞系建立成功。
　　臨床調(diào)查:本次調(diào)查的95例患者

5、平均生存時(shí)間26個(gè)月，其中耐藥人數(shù)17人，約占18％，其平均生存時(shí)間約16個(gè)月。其中初始即發(fā)生耐藥患者4人，約占耐藥組人數(shù)的24％（約占患者總數(shù)的4％），繼發(fā)耐藥患者13人，約占耐藥組人數(shù)的76％（約占患者總數(shù)的14％）;非耐藥患者78人，平均生存時(shí)間約28個(gè)月。兩者的總生存時(shí)長(zhǎng)經(jīng)檢驗(yàn)P=0.002，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。耐藥的產(chǎn)生與年齡(P=0.318)，性別(P=0.075)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:實(shí)驗(yàn)測(cè)得耐藥細(xì)胞IC50值