芍藥苷在晚期糖基化終產物誘導內皮細胞損傷中的作用及其機制的探討.pdf

1、目的：我們的實驗研究證明，芍藥苷（PF）在晚期糖基化終產物（AGEs）誘導人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）損傷中有保護作用，并進一步探討其潛在的作用機制。
　　方法：1.以人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）為研究對象，通過晚期糖基化終產物（AGE-BSA）作用建立細胞損傷模型。采用 MTT法檢測晚期糖基化終產物作用6 h后細胞活力的改變，及用25μM芍藥苷預處理0.5 h后對細胞活力的影響；用蛋白印跡（Western blot）法測

2、定LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白的表達水平的變化。2.利用siRNA進行對Atg5基因及RAGE基因行基因沉默或基因敲減，觀察基因敲減后細胞活力及LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白表達水平的改變。
　　結果：1. MTT法檢測結果顯示，與對照組相比，AGE-BSA作用于 HUVECs6h后細胞活力明顯下降（P<0.001），芍藥苷預處理組細胞活力的改變與芍藥苷濃度呈劑量依賴關系。同樣，western blot結果顯示，

3、與對照組相比，AGE-BSA組LC3-II及 RAGE蛋白表達顯著增加；P62蛋白稍有表達增加，但無明顯統(tǒng)計學意義；與 AGE-BSA組相比，25μM PF預處理組 LC3-II、RAGE進一步升高（P<0.05），P62表達降低（P<0.05）。2．利用siRNA對Atg5基因及RAGE基因進行基因沉默或敲減后，結果顯示，與 AGE-BSA和 PF+ AGE-BSA組相比，siRNA敲減后細胞活力明顯下降，LC3-II的表達較前明顯減