人參屬植物低極性皂苷的制備及抗菌活性研究.pdf

1、人參皂苷是西洋參（Panax quenquifolium.L）、三七(Panax notoginseng)、人參(Panax ginseng)等人參屬植物（Panax）所含皂苷組分的統(tǒng)稱。根據(jù)化學(xué)極性的強(qiáng)弱，人參皂苷可分為低級性皂苷和極性皂苷兩大類。人參屬植物中天然存在的皂苷主要為極性皂苷。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，低級性皂苷表現(xiàn)出強(qiáng)于極性皂苷的抑制肥胖、抗疲勞、抗癌等藥理活性，但由于轉(zhuǎn)化率低、生產(chǎn)成本高，低級性皂苷難以工業(yè)化生產(chǎn)。由致病性微生

2、物引起口臭和皮癬等疾病十分常見。從天然產(chǎn)物中發(fā)掘防治相關(guān)疾病的活性成分是近年來的研究熱點(diǎn)之一，而針對人參皂苷抑制口臭和皮癬致病菌作用的研究尚未系統(tǒng)開展。本論文以不同人參屬植物總皂苷為原料，轉(zhuǎn)化制備低級性皂苷，對轉(zhuǎn)化前后的皂苷組分進(jìn)行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定，同時(shí)研究了低級性皂苷對口臭及皮癬主要致病菌的抗菌活性和機(jī)理，并最終研發(fā)出具有抑菌效果的牙膏和含漱液產(chǎn)品。本文的主要研究包括以下幾個(gè)方面:
　　(1)分別考察人參、西洋參、三七的根和莖

3、葉總皂苷轉(zhuǎn)化制備低級性皂苷的轉(zhuǎn)化率和總皂苷的損失率。西洋參莖葉總皂苷的皂苷含量為0.81±0.003 mg/mg，主要為Rb2、Rg2(S)、Rd等極性皂苷，經(jīng)過熱處理后，低極性皂苷含量為0.76±0.04 mg/mg，轉(zhuǎn)化率為80.4％，皂苷損失率為6.7％。三七根總皂苷的皂苷含量為0.66±0.06 mg/mg，主要為R1、Re/Rg1、Rb1及Rd，熱處理后90％的皂苷轉(zhuǎn)化成低極性皂苷，皂苷損失率僅為0.90％。西洋參莖葉和三七根

4、總皂苷轉(zhuǎn)化率高、損失率低，適合作為生產(chǎn)低極性皂苷的材料。
　　(2)對西洋參莖葉轉(zhuǎn)化皂苷的化學(xué)組成進(jìn)行鑒定，采用硅膠、Sephadex LH-20、C-18、制備高效液相等多種手段，從中分離得到21個(gè)化合物，通過理化性質(zhì)及UV、NMR、2DNMR、MS等波譜分析，鑒定化合物19個(gè)，分別為人參皂苷20(E)-Rh4、20R-Rg3、Rk3、20(z)-Rh4、Rh2、20(z)-Rg6、F4、20(S)-Rh2、20(S)-Rg3、

5、20S-Rg5、Rs3、Rk2、20S-Rg2、20R-Rg2、Rg1、Rc、Rd、Rb2、20(S)-Rh1和原人參二醇。
　　(3)系統(tǒng)研究了人參皂苷的抗菌活性，采用MIC及MBC方法考察人參皂苷對三種口腔致病菌（牙齦卟啉單胞菌、具核梭桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌）和四種皮膚致病真菌（白色假絲酵母、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌、須毛癬菌）的抑制作用，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化前總皂苷(AGS)對上述微生物無明顯抑制作用，而轉(zhuǎn)化后的低極性皂苷(HTS)有明顯的

6、抑菌作用，產(chǎn)氣莢膜桿菌及牙齦卟、啉單胞菌對HTS-4最為敏感，其MIC值都為9.8μg/mL，而其MBC都為312.5μg/mL。低級性皂苷對真菌也有抑制作用，絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌對HTS-4最為敏感，其MIC值都為16μg/mL，而其MBC都為62μg/mL。人參皂苷單體抗菌實(shí)驗(yàn)證明低極性皂苷的抗菌活性要強(qiáng)于極性皂苷。
　　(4)考察了低極性皂苷對微生物膜系統(tǒng)完整性的影響，探究其抑菌機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，低級性皂苷HTS-4處理2