人參皂苷固體脂質(zhì)納米粒的制備和吸收研究.pdf

1、研究背景和目的： 固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN) 給藥系統(tǒng)是目前國(guó)內(nèi)外研究最熱門的新型給藥系統(tǒng)之一。 SLN是繼乳劑、脂質(zhì)體、微粒和毫微粒后發(fā)展起來(lái)的，以生理相容性好、體內(nèi)可生物降解的天然類脂材料為藥物載體的亞微粒給藥系統(tǒng)。SLN在室溫下通常呈現(xiàn)固態(tài)，具有聚合物納米粒物理穩(wěn)定性高、藥物泄漏少的優(yōu)勢(shì)，又兼有脂質(zhì)體、乳劑毒性低、能大規(guī)模生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)，是一種潛在的新型給藥系統(tǒng)。 人參

2、的主要活性成分是人參皂苷(ginsenoside)，目前已分離并鑒定的人參皂苷達(dá)60余種，各種人參皂苷都有其獨(dú)特的生理活性。大量研究結(jié)果表明：人參皂苷具有抗疲勞、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)等作用。長(zhǎng)期以來(lái)人參的主要給藥途徑是口服，但越來(lái)越多的研究表明，人參皂苷經(jīng)口服的生物利用度低。 本研究選擇SLN作為載體，旨在研制Ginsenoside-Rd的新型給藥系統(tǒng)，通過(guò)制劑學(xué)手段

3、，減緩藥物的釋放，延長(zhǎng)人參皂苷在體內(nèi)的停留時(shí)間，提高口服生物利用度。 方法： 1.比較幾種固體脂質(zhì)納米粒制備方法：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)．超聲法、乳化-蒸發(fā)法、高剪切超聲分散法和高壓乳勻法；并在單因素考察的基礎(chǔ)上，采用正交設(shè)計(jì)進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳處方組成和制備工藝條件； 2.建立Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒含量測(cè)定的HPLC方法；用凝膠柱層析法和HPLC法測(cè)定納米粒的包封率；用透射電鏡觀察納米粒形態(tài)；用光子相關(guān)光譜

4、儀測(cè)定納米粒粒徑和Zeta電位；用透析法考察納米粒的體外釋藥行為： 3.采用冷凍干燥技術(shù)將納米?；鞈乙褐苽涑蓛龈煞坩槪瑢?duì)制備工藝及所得產(chǎn)品的性質(zhì)進(jìn)行初步考察； 4.采用大鼠在體分段腸回流實(shí)驗(yàn)，研究Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒的腸吸收行為； 5.建立生物樣品中Ginsenoside-Rd的HPLC分析方法，通過(guò)大鼠灌胃口服Ginsenoside-Rd-SLN和對(duì)照液，測(cè)定不同時(shí)間的血藥濃度，以統(tǒng)計(jì)矩計(jì)

5、算載藥固體脂質(zhì)納米粒在體內(nèi)的吸收和釋藥動(dòng)力學(xué)特征。 結(jié)果： 1.用高壓乳勻法成功制備了Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒，成品呈淡藍(lán)色乳光透明混懸液，顏色均勻。 2.(1)用電子顯微鏡負(fù)染色法觀察納米粒表面形態(tài)，呈表面圓整的球狀，大小相近，分散均勻。用Zetasizer 3000(粒度測(cè)定儀)測(cè)定，所得三批納米粒粒徑分別為1034±17.9 nm，98±24.6 nm，107±38.5 nm；Zeta電位

6、分別為-43.24±10.3mV，-41.54±9.3 mV，-50.14±8.9 mV；(2)包封率：(81.784±2.63)％(n=3)。(3)藥物總濃度：(0.244±0.01)g/ml(n=3)。(4)載藥量：(6.384±0.21)％(n=3)。(5)穩(wěn)定性良好：在4℃下保存4周后，SLN粒徑均稍有增加，包封率下降不明顯。 3.(1)制得的Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒凍干粉均呈疏松，均勻，飽滿狀，加水輕

7、搖即可良好分散。凍干粉西林瓶密封后，可長(zhǎng)時(shí)間保存并保持外觀不變。(2)Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒凍干粉水重分散后的外觀和包封率變化不大。包封率：(82.20±2.53)％(n=3)，第15天：(80.94±2.07)％(n=3)，第4周：(79.75±0.77)％(n=3)，第12周：(80.83±1.91)％(n=3)。 4.在體腸回流Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒和對(duì)照溶液在各腸段的吸收，結(jié)果表明

8、，低濃度組在回腸和結(jié)腸段，納米粒與Ginsenoside-Rd溶液的吸收率相比均有顯著性差異(P<0.05)；高濃度組在十二指腸、回腸和結(jié)腸段，均有顯著性差異(P<0.05)。 5.SD大鼠灌胃口服Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒和對(duì)照液，結(jié)果表明納米粒使得Ginsenoside-Rd在大鼠體內(nèi)的平均滯留時(shí)間延長(zhǎng)，呈現(xiàn)緩釋效果，并且明顯地提高了Ginsenoside-Rd-SLN的生物利用度。其中Ginsenoside

9、-Rd-SLN組的Cmax明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；Ginsenoside-Rd-SLN組的平均MRT也較對(duì)照組延長(zhǎng)(P<0.05)；Ginsenoside-Rd-SLN組的平均AUMC，AUC0-t和AUCo→∞約分別為對(duì)照組的2倍，1.5倍和2倍。 結(jié)論： 綜上所述，本實(shí)驗(yàn)成功制備了Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒，并確定了Ginsenoside-Rd固體脂質(zhì)納米粒的理化性質(zhì)、質(zhì)量評(píng)價(jià)及穩(wěn)定性研究。G