龜甲膠、鹿角膠對豚鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞內(nèi)JNK、P38 MAPK表達的影響.pdf

1、目的:
　　通過觀察龜甲膠、鹿角膠含藥培養(yǎng)液對豚鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞的增殖及JNK、P38MAPK表達的影響，進一步明確龜甲膠、鹿角膠調(diào)控豚鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞退化的作用機制，為闡述中藥通過干預(yù)關(guān)節(jié)軟骨細胞JNK、P38 MAPK表達以防治骨關(guān)節(jié)炎提供新依據(jù)。
　　方法:
　　1.將實驗分為4組(龜甲膠組、鹿角膠組、鹽酸氨基葡萄糖組和空白組，分別簡單記為G組、L組、A組和K組)，制備各組含藥培養(yǎng)液。
　　2.對3月齡豚鼠

2、OA軟骨細胞分離、培養(yǎng)及鑒定，并建立軟骨細胞體外培養(yǎng)體系。
　　3.MTT比色法觀察4組中各標(biāo)記含藥培養(yǎng)液分別對豚鼠F2代OA軟骨細胞增殖的影響。
　　4.Western-Blot檢測各組豚鼠OA軟骨細胞內(nèi)JNK、P38 MAPK的表達量。
　　5.QPCR測定各組豚鼠OA軟骨細胞內(nèi)JNK、P38 MAPK的mRNA含量。
　　結(jié)果:
　　1.Ⅱ型膠原免疫組化染色和甲苯胺藍染色均為陽性，提示成功獲取并建立豚

3、鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞體外培養(yǎng)體系。
　　2.MTT比色法結(jié)果:龜甲膠、鹿角膠和鹽酸氨基葡萄糖含藥培養(yǎng)液對豚鼠OA軟骨細胞均有促增殖作用，效果為G組＞L組＞A組＞K組，且P＜0.05。
　　3.Western-Blot法結(jié)果:龜甲膠、鹿角膠和鹽酸氨基葡萄糖含藥培養(yǎng)液均能有效抑制JNK、P38 MAPK的表達，其抑制效果為G組＞L組＞A組＞K組，且P＜0.05。
　　4.QPCR結(jié)果:龜甲膠、鹿角膠和鹽酸氨基葡萄糖含藥培養(yǎng)液均能