2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察索拉非尼對裸鼠移植瘤生長情況的影響并檢測腫瘤組織miRNA的表達(dá)變化,分析討論miRNA在索拉非尼抑制癌細(xì)胞增殖、抗血管形成及促上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial to mesenchymal transitnio,EMT)發(fā)生等過程中的調(diào)控作用。
  方法:
  1、建立裸鼠腹腔移植瘤模型:
  選擇高轉(zhuǎn)移潛能人肝癌細(xì)胞株MHCC-97H建立裸鼠皮下荷瘤模型,待荷瘤長至約1.5cm3,處死荷瘤裸鼠,取出腫瘤

2、組織,將瘤塊剪成3mm直徑小塊供實驗用。實驗裸鼠分A組(實驗組)和B組(對照組),每組6只,將預(yù)先處理好的實驗用瘤組織各1塊埋入裸鼠腹腔建立裸鼠腹腔移植瘤模型。術(shù)后A組裸鼠每日索拉非尼30mg/kg(0.2ml)灌胃,日1次,B組給予等體積的溶劑,35天后處死所有裸鼠,取材。
  2、對比索拉非尼治療組及對照組腫瘤的大小,免疫組織化學(xué)染色法檢測兩組腫瘤組織微血管密度(microvessel density,MVD)、內(nèi)源性缺氧標(biāo)記

3、物HIF-1α(Hypoxia-inducible factor-1α)、E-鈣粘素(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表達(dá)變化。
  3、利用基因芯片技術(shù)檢測實驗組及對照組miRNA表達(dá)情況,并對其結(jié)果進(jìn)行生物信息學(xué)分析。Gene Ontology(GO)用來分析靶基因的分子功能。靶基因的顯著性信號通路利用Kyoto Encyclopedia of Genes andGenomes(KEGG)進(jìn)行分析。

4、>  4、通過生物信息學(xué)結(jié)果,分析并討論miRNA在索拉非尼抑制癌細(xì)胞增殖、抗血管形成及促使EMT發(fā)生等過程所起的調(diào)控作用。
  結(jié)果:
  1、A、B兩組裸鼠腹腔成瘤率均為100%,實驗期間兩組裸鼠均無死亡,未見明顯肉眼轉(zhuǎn)移。
  2、實驗組裸鼠腫瘤體積明顯小于對照組,MVD表達(dá)量明顯低于對照組,上述差異均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。實驗組HIF-1α表達(dá)量高于對照組,兩組比較具備統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);與對照

5、組相比,實驗組E-cadherin的表達(dá)明顯下調(diào),而Vimentin表達(dá)上調(diào),兩組比較均有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),提示索拉非尼促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的發(fā)生。
  3、基因芯片分析miRNA表達(dá)譜的差異發(fā)現(xiàn)28個miRNAs在實驗組及對照組中差異表達(dá),上調(diào)的miRNAs有20個,下調(diào)的miRNAs有8個。通過生物信息學(xué)分析結(jié)果判斷:miR-762、miR-150-5p明顯上調(diào),參與調(diào)控索拉非尼抑制肝癌細(xì)胞增殖;miR-142a-3p雖

6、然上調(diào)不明顯,但參與調(diào)控多個與腫瘤血管形成相關(guān)的生物學(xué)過程;上調(diào)的miR-155-5p及下調(diào)的miR-122-5p參與EMT的發(fā)生。
  結(jié)論:
  1、索拉非尼具有抑制腫瘤生長及抗血管形成的雙重作用;并致腫瘤組織缺氧,誘導(dǎo)腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的發(fā)生。
  2、miR-762、miR-150-5p參與調(diào)控索拉非尼抑制肝癌細(xì)胞增殖的過程,miR-142a-3p參與調(diào)控抗腫瘤血管形成過程。
  3、miR-155-5p及

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