電針對胰島素抵抗模型大鼠肝臟AMPK、ACC的干預(yù)機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　以高脂飲食誘導(dǎo)胰島素抵抗模型大鼠為研究對象，以噻唑烷二酮類藥物吡格列酮為對照，系統(tǒng)觀察針刺對胰島素抵抗大鼠血清脂聯(lián)素、游離脂肪酸含量的影響，肝臟AMPK、ACC蛋白表達(dá)的影響，以及肝臟超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)的改變，從而多層次、多水平詮釋針刺對胰島素抵抗脂質(zhì)代謝紊亂的調(diào)節(jié)效應(yīng)，為其強(qiáng)化胰島敏感功能提供新的理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　將52只雄性SPF級SD大鼠(180-220g)普通飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)5天，隨機(jī)抽出10只

2、為正常組，喂以普通飼料;余下大鼠改用高脂飼料喂養(yǎng)3個(gè)月為造模組。從第8周開始，每隔一周對所有大鼠進(jìn)行眼眶靜脈竇取血，檢測空腹血糖(FPG)、血漿胰島素(FINS)，并計(jì)算胰島素敏感指標(biāo)(ISI、HOMA-IR)，當(dāng)模型組大鼠ISI比空白組明顯降低（P＜0.05），HOMA-IR明顯升高（P＜0.05）時(shí)，即進(jìn)行高胰島素正葡萄糖鉗夾試驗(yàn)，當(dāng)葡萄糖輸注率(GIR)與空白組相比明顯降低（P＜0.05)時(shí)為造模成功。第12周造模成功后，采用分層

3、隨機(jī)法分為3組:模型組（11只）、西藥組（13只）、電針組（12只）。空白組繼續(xù)以普通飼料飼養(yǎng)2周，模型組繼續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)2周。電針組繼續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)2周，同時(shí)給予電針治療，穴取“豐隆”、“三陰交”，1次/日。西藥組續(xù)以高脂飼料飼養(yǎng)2周，同時(shí)給予吡格列酮懸濁液10mg/kg灌胃，1次/日。各組大鼠于治療結(jié)束后眼眶靜脈竇采血檢測FINS、ADP、FFA等指標(biāo)，F(xiàn)PG測定采用葡萄糖氧化酶法，F(xiàn)INS、ADP、FFA測定采用ELISA法。

4、取肝臟，使用蛋白印跡檢測手段，觀察針刺前后胰島素抵抗模型大鼠肝臟AMPK、ACC蛋白表達(dá)情況。使用透射電鏡觀察針刺后胰島素抵抗模型大鼠肝臟組織超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)的改變。
　　結(jié)果:
　　1.高脂飼料飼養(yǎng)12周后，模型組、西藥組、電針組大鼠的GIR均較空白組顯著降低（P＜0.01)，表明造模成功。經(jīng)過2周治療后，西藥組、電針組的GIR較模型組顯著升高（P＜0.01）。
　　2.透射電鏡觀察:空白組干細(xì)胞中細(xì)胞器結(jié)構(gòu)完好，線粒

5、體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，胞漿內(nèi)無脂滴及脫顆?，F(xiàn)象，線粒體膜、嵴結(jié)構(gòu)完整，排列規(guī)則，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)排列整齊;模型組肝細(xì)胞內(nèi)可見大量脂滴分布，線粒體呈現(xiàn)不同程度腫脹，線粒體嵴變少變短，甚至出現(xiàn)空泡化。通過治療，西藥組、電針組肝細(xì)胞胞漿中脂滴較模型組減少，線粒體腫脹減輕，內(nèi)外膜部分融合。
　　3.模型組血清中ADP較空白組顯著性降低（P＜0.01)，F(xiàn)FA較空白組顯著性升高（P＜0.01)。經(jīng)治療后，西藥組、電針組的ADP較模型組顯著性升高（P

6、＜0.01，P＜0.05)，F(xiàn)FA較模型組顯著性降低（P＜0.01，P＜0.05)。
　　4.模型組大鼠肝臟的AMPK蛋白水平較空白組顯著降低（P＜0.01)，ACC蛋白水平顯著性升高（P＜0.05）。經(jīng)治療后，西藥組、電針組AMPK蛋白水平較模型組顯著升高（P＜0.01，P＜0.05);西藥組、電針組ACC蛋白水平較模型組顯著降低（P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　研究表明，電針可通過激活脂聯(lián)素介導(dǎo)的信號通路，上調(diào)A