nm23通過(guò)PI3K-Akt-mTOR信號(hào)通路調(diào)節(jié)子宮基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化.pdf

1、目的：
　　成功的胚胎著床依賴(lài)于有良好活性的胚泡和處于容受態(tài)的子宮二者間的相互作用，在這一過(guò)程中母體子宮內(nèi)膜涉及到一系列基因和信號(hào)通路的表達(dá)和變化。nm23是最早發(fā)現(xiàn)的抑制細(xì)胞遷移的基因，參與細(xì)胞各種生理過(guò)程，例如增殖、分化。為了探究nm23在胚胎著床中的調(diào)控作用，我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)、Western Blot、RT-qPCR研究nm23基因在早孕小鼠模型，假孕小鼠模型的表達(dá)規(guī)律；檢測(cè)nm23基因在人的子宮內(nèi)膜組織及蛻膜組織中

2、的表達(dá)模式；通過(guò)體內(nèi)和體外人工誘導(dǎo)蛻膜化研究 nm23在基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化過(guò)程中的調(diào)控作用；利用體外激素模型驗(yàn)證激素對(duì)nm23的調(diào)節(jié)作用；并借助基質(zhì)細(xì)胞體外功能試驗(yàn)進(jìn)一步探究PI3K-Akt-mTOR信號(hào)通路在nm23調(diào)控的蛻膜化過(guò)程中的作用。
　　方法:
　　(1)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)，Western blot及RT-qPCR檢測(cè)nm23在早孕小鼠模型和假孕小鼠模型中的表達(dá)規(guī)律。
　　(2)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)及West

3、ern blot檢測(cè)nm23在正常人子宮內(nèi)膜組織以及蛻膜組織中的表達(dá)規(guī)律。
　　(3)通過(guò)體內(nèi)及體外人工誘導(dǎo)蛻膜化實(shí)驗(yàn)，探討nm23在子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的蛻膜化的調(diào)控作用。
　　(4)利用分離的原代小鼠子宮基質(zhì)細(xì)胞和人的子宮基質(zhì)細(xì)胞系建立體外激素模型探討激素對(duì)nm23是否有調(diào)節(jié)作用。
　　(5)通過(guò)基質(zhì)細(xì)胞體外功能試驗(yàn)檢測(cè)nm23在蛻膜化過(guò)程中的潛在機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　(1)nm23-m1在早孕小鼠模型中

4、主要表達(dá)在蛻膜區(qū)，其在假孕小鼠模型的表達(dá)模式與早孕小鼠模型相似。
　　(2)在人的子宮組織表達(dá)模式中，相對(duì)于增生期和分泌期子宮內(nèi)膜組織，nm23-h1在蛻膜組織中呈高表達(dá)。
　　(3) nm23-m1在體內(nèi)人工誘導(dǎo)蛻膜化組織表達(dá)升高，并且，si-nm23可以顯著降低基質(zhì)細(xì)胞的增殖和分化進(jìn)而來(lái)影響蛻膜化過(guò)程。
　　(4)小鼠和人的基質(zhì)細(xì)胞激素模型證明雌激素和孕激素對(duì)nm23基因有調(diào)節(jié)作用。
　　(5)PI3K-Ak