乳腺癌前哨淋巴結(jié)新型熒光靶向示蹤劑的動(dòng)物模型研究.pdf

1、背景與目的:前哨淋巴結(jié)(Sentinel Lymph Node，SLN)活檢已成為臨床腋淋巴結(jié)陰性早期乳腺癌病人的標(biāo)準(zhǔn)處理模式，并對(duì)乳腺癌的分期和治療方案的選擇至關(guān)重要。該研究將吲哚菁綠(Indocyanine Green，ICG)和利妥昔單抗(Rituximab)進(jìn)行偶聯(lián)作為新型示蹤劑，采用小鼠后肢SLN動(dòng)物模型，模擬乳腺癌SLN活檢術(shù)，探索其SLN的定位效應(yīng)。
　　方法:首先建立小鼠后肢淋巴引流模型。①Balb/c小鼠后肢腳背

2、皮下注射不同劑量(0.48μg、0.24μg、0.12μg、0.06μg)的ICG-Rituximab，并應(yīng)用熒光脈管系統(tǒng)成像儀連續(xù)觀測(cè)腘窩淋巴結(jié)(SLN)至開(kāi)始顯像，后每隔5min觀察一次持續(xù)至3h，記錄SLN開(kāi)始出現(xiàn)熒光顯像的時(shí)間以及達(dá)到最佳顯像效果所需的時(shí)間。3h脫頸椎處死小鼠（處死前5min于小鼠后肢腳背皮下相同位置注射亞甲藍(lán)染料），解剖SLN及后續(xù)引流淋巴結(jié)，應(yīng)用熒光脈管系統(tǒng)成像儀測(cè)量有無(wú)熒光顯像，確定示蹤劑的最佳注射劑量;②

3、最佳注射劑量的ICG-Rituximab（0.12μg，ICG的含量）注射于小鼠后肢腳背皮下后分別于6h、12h、24h脫頸椎處死小鼠（處死前5min以相同方式注射亞甲藍(lán)染料），解剖SLN及后續(xù)引流淋巴結(jié)，應(yīng)用熒光脈管系統(tǒng)成像儀測(cè)量有無(wú)熒光顯像。
　　結(jié)果:定義腘窩淋巴結(jié)為小鼠后肢淋巴引流的SLN，髂淋巴結(jié)為次級(jí)淋巴結(jié)，主動(dòng)脈旁或腎旁淋巴結(jié)為第三級(jí)淋巴結(jié)（個(gè)別小鼠主動(dòng)脈旁淋巴結(jié)缺如，此時(shí)選取腎旁淋巴結(jié)為第三級(jí)淋巴結(jié)）。隨著注射劑量

4、的增加，SLN開(kāi)始顯像的時(shí)間與達(dá)到最佳顯像效果所需的時(shí)間均逐漸縮短，次級(jí)及第三級(jí)淋巴結(jié)顯像率逐漸升高。新型示蹤劑的最佳注射劑量為0.12μg（ICG的含量），達(dá)到最佳顯像效果的時(shí)間約為34min。觀察至24h，SLN顯像率維持在100％，次級(jí)及第三級(jí)淋巴結(jié)顯像率由6h的0％和0％上升至24h的20％和10％。
　　結(jié)論:本研究建立的小鼠后肢SLN動(dòng)物模型設(shè)置簡(jiǎn)單，成本低，淋巴系統(tǒng)發(fā)達(dá)可以清晰揭示示蹤劑在淋巴管和淋巴結(jié)中的引流情況。