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文檔簡介
1、研究背景:神經(jīng)膠質(zhì)瘤是一種發(fā)源于神經(jīng)外胚層的常見顱內(nèi)腫瘤,臨床上以浸潤性生長和廣泛侵襲性為主要特點并伴有轉(zhuǎn)移現(xiàn)象的發(fā)生,已成為危害人類生命健康的主要腫瘤之一。盡管診斷和治療水平的提高使得神經(jīng)膠質(zhì)瘤的局控率有明顯改善,但是目前臨床上仍無法找到克服膠質(zhì)瘤廣泛侵襲和轉(zhuǎn)移的好辦法。在基礎(chǔ)實驗中,以往主要是在體外去研究膠質(zhì)瘤發(fā)病的分子機理,相關(guān)的體內(nèi)分子機制研究主要是使用傳統(tǒng)的嚙齒動物——大小鼠模型。此類模型周期長,效率低,也很難動態(tài)監(jiān)測腫瘤的體
2、內(nèi)發(fā)展情況。這些缺點極大的制約了膠質(zhì)瘤體內(nèi)分子作用機制的研究。因此,建立新的膠質(zhì)瘤模型,全面地解析神經(jīng)膠質(zhì)瘤浸潤性生長和轉(zhuǎn)移的分子機制,深入探索神經(jīng)膠質(zhì)瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)標(biāo)志物,是有效控制神經(jīng)膠質(zhì)瘤進一步惡化,提高患者生存率的關(guān)鍵。斑馬魚作為脊椎動物模式生物具備了自己很多獨特的優(yōu)點:它易于飼養(yǎng),經(jīng)濟方便,產(chǎn)卵量高,斑馬魚體外受精,胚胎透明,易于實驗觀察,其基因組與人來有著高度的同源性,分子遺傳學(xué)操作簡便易行。在自然界中,斑馬魚也會自發(fā)產(chǎn)生各利
3、組織器官的癌變,并且與人類的腫瘤在器官和組織水平上都有著很大的相似性,其致癌基因也與人類的癌癥相關(guān)基因有著很大的保守性。斑馬魚腫瘤模型在抗腫瘤藥物篩選及其分子靶標(biāo)研究中更是具備了高效性和動態(tài)觀察的優(yōu)勢,并逐漸成為國際上腫瘤體內(nèi)研究中的熱門工具。
目的:我們借助斑馬魚胚胎建立膠質(zhì)瘤模型可以解決神經(jīng)膠質(zhì)瘤體內(nèi)分子作用機制研究中周期長和效率低的難點,并可以高效的進行抗腫瘤藥物的篩選。利用此種模式生物,我們可以研究神經(jīng)膠質(zhì)瘤體內(nèi)治
4、療中新的分子作用靶標(biāo)及其信號通路中靶標(biāo)分子的作用機制,為神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療尋找新的突破。
方法:首先使用細胞生物學(xué)方法建立熒光標(biāo)記的膠質(zhì)瘤細胞系,接著使用顯微注射法將膠質(zhì)瘤細胞移植入斑馬魚體內(nèi),最后使用原位雜交、熒光定量RT-PCR、血管內(nèi)源性堿性磷酸酶染色及熒光顯微鏡直接觀察轉(zhuǎn)基因魚等方法檢測膠質(zhì)瘤細胞和斑馬魚的相關(guān)變化情況。
結(jié)果:我們成功的建立了斑馬魚神經(jīng)膠質(zhì)瘤模型,并發(fā)現(xiàn)人膠質(zhì)瘤細胞可以在斑馬魚胚胎體內(nèi)
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