黑色素瘤黏附分子促進斑馬魚神經(jīng)修復的炎癥與血管機制研究.pdf

1、黑色素瘤黏附分子（MCAM）是屬于免疫球蛋白超家族中的一個多功能分子，在某些腫瘤血管再生、炎癥反應、胚胎的發(fā)育中起重要作用。此外MCAM在斑馬魚、雞、小鼠、大鼠、人基因組中有著較高的保守性。近年來對于MCAM的研究較多，其中較多的研究側重于此分子在腫瘤血管再生及一些炎癥反應中的作用，然而MCAM在神經(jīng)外傷修復中的作用機制研究尚少，在此我們基于前人的研究進一步拓展了MCAM在斑馬魚脊髓損傷修復過程中的作用。
　　本實驗中，我們利用成

2、年斑馬魚脊髓損傷模型研究了MCAM在損傷后脊髓神經(jīng)細胞中的表達情況及其在血管再生和炎癥反應中的作用。通過原位雜交與免疫熒光共標實驗，我們發(fā)現(xiàn)MCAM分子可以表達在運動神經(jīng)元（Islet-1）及未成熟的神經(jīng)元(HuC/D)中，且隨著MCAM表達水平的升高，運動神經(jīng)元的數(shù)量也發(fā)生增加。利用綠色熒光蛋白標記的血管轉基因斑馬魚進行脊髓損傷手術，發(fā)現(xiàn)損傷后的11d脊髓血管有明顯的再生，而且MCAM可以表達在熒光血管中。為了進一步闡述MCAM在斑馬

3、魚脊髓損傷后血管再生中的作用，我們用MCAM Morpholino（MCAM MO）抑制斑馬魚脊髓中MCAM蛋白的表達，發(fā)現(xiàn)血管再生相關因子VEGFR-2、p-p38、p-AKT的下調。此外我們利用morpholino抑制方法也證明了在斑馬魚脊髓損傷后相關炎癥因子TNF-α,IL-1β和IL-8及干細胞增殖相關因子gata3的下調。結合本實驗前人的研究（MCAM mRNA在斑馬魚脊髓損傷后的6d,11d表達有所升高，抑制MCAM蛋白表達