SpA對(duì)單核巨噬細(xì)胞表達(dá)早期致炎因子的影響.pdf

1、目的：
　　探討SpA刺激單核巨噬細(xì)胞后，對(duì)其表達(dá)早期致炎因子TNF-α、IL-1和IL-6的影響及規(guī)律，以了解金黃色葡萄球菌性膿毒癥的發(fā)生機(jī)制，為尋找治療金黃色葡萄球菌性膿毒癥的新靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　用S1800按本室常規(guī)制備SpA。以THP-1細(xì)胞為靶細(xì)胞，經(jīng)PMA誘導(dǎo)為單核巨噬細(xì)胞后與一定濃度SpA培養(yǎng)不同時(shí)間，用MTT法測(cè)定SpA對(duì)THP-1細(xì)胞增殖的影響；用ELISA測(cè)定培養(yǎng)上清液中TNF-α

2、、IL-1和IL-6的含量；用RT-PCR檢測(cè)沉淀細(xì)胞TNF-α、IL-1和IL-6相應(yīng)mRNA的表達(dá)。并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1.MTT結(jié)果顯示，SpA對(duì)THP-1細(xì)胞增殖的影響與其作用劑量有關(guān)，100μg/mLSpA對(duì)其增殖作用最明顯，100μg/mL與500μg/mL組間無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.SpA刺激可促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌TNF-α、IL-1和IL-6及表達(dá)相應(yīng)mRNA，且呈一定劑量—效應(yīng)和

3、時(shí)間—效應(yīng)關(guān)系。100μg/mL SpA刺激作用較明顯（P<0.01），100μg/mL與500μg/mLSpA刺激作用無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。SpA刺激巨噬細(xì)胞后TNF-α、IL-1和IL-6的表達(dá)12h達(dá)高峰，SpA刺激12h與24h結(jié)果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。SpA刺激組單核巨噬細(xì)胞表達(dá)和釋放TNF-а、IL-1和IL-6的時(shí)間點(diǎn)與早期致炎細(xì)胞因子分泌特點(diǎn)相一致；SpA刺激組與對(duì)照組比較，刺激組TNF-а、IL