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文檔簡(jiǎn)介
1、牛傳染性鼻氣管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是一種牛的具有潛伏感染和持久感染特點(diǎn),并能引起牛多系統(tǒng)感染的急性接觸性傳染病。本試驗(yàn)從牛外周血分離培養(yǎng)單核巨噬細(xì)胞,并對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和流式細(xì)胞術(shù)鑒定;應(yīng)用絕對(duì)熒光定量PCR方法檢測(cè)牛傳染性鼻氣管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV)在單核巨噬細(xì)胞內(nèi)的增殖規(guī)律;通過相對(duì)熒光定量PC
2、R方法對(duì)牛單核巨噬細(xì)胞體外感染IBRV后,0、6、12、24及48h時(shí)表達(dá)IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-ɑ等細(xì)胞因子mRNA轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行分析。試驗(yàn)結(jié)果如下:
?。?)通過密度梯度法分離培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞,經(jīng)過形態(tài)學(xué)觀察和流式細(xì)胞術(shù)鑒定,確認(rèn)為單核巨噬細(xì)胞。
(2)IBRV感染體外培養(yǎng)的單核巨噬細(xì)胞后,在前6h增殖最快,之后增殖相對(duì)比較緩慢,在96h達(dá)到峰值,之后隨著時(shí)間的增加,IBRV在巨噬細(xì)胞中的含量
3、開始降低。
?。?)IBRV感染體外培養(yǎng)的單核巨噬細(xì)胞后,可以顯著降低IL-4、IL-6和IL-8的mRNA轉(zhuǎn)錄水平(P<0.05)。
?。?)IBRV感染體外培養(yǎng)的單核巨噬細(xì)胞后,可以顯著升高IL-10及TNF-ɑ的mRNA轉(zhuǎn)錄水平(P<0.05)。
本試驗(yàn)通過檢測(cè) IBRV感染單核巨噬細(xì)胞后,IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-ɑ等細(xì)胞因子表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化,分析IBRV對(duì)牛單核巨噬細(xì)胞免疫學(xué)
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